[发明专利]一种猪源衍生杂合抗菌肽MDP-2及其制备方法和应用有效
申请号: | 201910629136.1 | 申请日: | 2019-07-12 |
公开(公告)号: | CN110283253B | 公开(公告)日: | 2020-04-10 |
发明(设计)人: | 马清泉;孟庆维;李锋;陈志辉;单安山;朱佳良 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;A61K38/17;A61P31/04 |
代理公司: | 哈尔滨市哈科专利事务所有限责任公司 23101 | 代理人: | 吴振刚 |
地址: | 150030 黑龙江省哈尔滨市香*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 衍生 抗菌 mdp 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种猪源衍生杂合抗菌肽MDP-2,其特征在于:其序列如序列表SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的一种猪源衍生杂合抗菌肽MDP-2制备方法,其特征在于,方法步骤如下:
(1)根据cathelicidin家族抗菌肽PMAP-23或PMAP-36的氨基酸组成特点和分布,将天然抗菌肽进行截短和残基替换,得到猪源衍生肽;将猪源衍生肽与髓样分化蛋白-2的脂多糖绑定序列FSKGKYKCV相互连接,以进一步增强猪源衍生肽的细菌靶定能力,最后获得氨基酸长度从20至24不等的4条猪源衍生杂合肽MDP-1,MDP-2,MDP-3和MDP-4,其序列分别如序列表SEQ ID No.1-4所示;
(2)采用固相化学合成法,通过多肽合成仪合成这几条多肽;
(3)将合成的多肽使用反相高效液相色谱进行纯化,并利用电喷射质谱法对合成的多肽进行鉴定,完成多肽的制备;
(4)采用美国临床实验室标准化研究所推荐的测定最小抑菌浓度的方法,发现猪源衍生杂合肽MDP-2的最小抑菌浓度平均达到4μM,相比于其他猪源衍生杂合肽的抑菌活性强,通过最小溶血浓度测定多肽的细胞毒性,发现4条多肽在256μM浓度均没有细胞毒性,猪源衍生杂合肽MDP-2的治疗指数最高达到了128,综合抑菌活性和溶血活性,从而选取猪源衍生杂合肽MDP-2。
3.如权利要求1所述的一种猪源衍生杂合抗菌肽MDP-2在制备治疗革兰氏阳性菌或/和革兰氏阴性菌感染性疾病药物中的应用。
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