[发明专利]可以改善自身免疫性疾病的免疫细胞及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种可以改善自身免疫性疾病的免疫细胞及其制备方法与应用，所述免疫细胞的制备方法包括：体外分离并纯化外周血单个核细胞；用细胞激活因子I激活外周血单个核细胞；其中，细胞激活因子I含有IL‑2、IL‑1α、IFN‑γ、IL‑12，以生理盐水配置；用细胞激活因子II将激活后的细胞进行扩增；其中，细胞激活因子II含有IL‑2、IFN‑γ、IL‑12，以生理盐水配置；收获免疫细胞。本发明的免疫细胞可通过将免疫向Th1方向调节，加强患者的Th1反应，平衡Th1/Th2；能缓解诸如过敏性鼻炎、哮喘、花粉过敏及类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的症状。

技术领域

本发明是关于一种可以改善自身免疫性疾病的免疫细胞及其制备方法与应用，具体地说，是关于一种激活并扩增外周血单个核细胞制备得到的免疫细胞AARI(Autoimmuneand Allergy Regulator Immune Cells)及其制备方法，以及在制备用于改善自身免疫性疾病的制剂中的应用，属于生物技术领域。

背景技术

自身免疫性疾病(Autoimmune diseases)是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。初始CD4+T淋巴细胞接受抗原刺激的信号，在共刺激信号以及共刺激分子的共同作用下活化，在不同条件下可分化成不同亚型的T淋巴细胞，包括Th1(T help1)型、Th2型、Th17型效应细胞，甚至分化为调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)，执行不同的生物学功能。

Th1细胞主要分泌γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β)，它主要介导细胞免疫应答。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10及IL-13等因子它主要介导体液免疫应答,辅助抗体生成，在过敏反应中起主导作用，使抗原特异的B细胞分泌Ig G1和Ig E抗体。Th1/Th2之间存在着互相调节的关系，即Th1/Th2功能平衡。但在疾病状态下，Th细胞受到特异抗原的刺激，一方面可能向Th1方向发展，另一方面可能向Th2方向发展。当Th1细胞因子功能亢进时，将导致炎症的慢性迁移、器官特异性自身免疫病、急性排斥反应和接触性皮炎的发病或免疫病理损伤；当Th2细胞因子功能亢进时，将导致特异性过敏反应，参与高Ig E综合症和嗜酸性粒细胞增多症。由此可见Th1/Th2的平衡是维持机体处于健康状态的重要机制之一，一旦此平衡被打破，将可能引起异常的免疫应答，从而产生病理状态。

Th1/Th2与过敏性疾病的关系，过敏性疾病与抗原特异性Th2优势应答密切相关，由Th2分泌的细胞因子促进Ig E的产生和嗜酸性粒细胞的炎症反应。

目前对Th 1/Th 2平衡调节的进展包括以下几个方面：①诱导CD4+T细胞无反应性或凋亡；②逆转免疫偏离，形成分化平衡；③作用于B细胞，诱导Ig E向Ig G(主要是向IgG4)发生类型转换；④作用于抗原提呈细胞，形成“递呈偏离”；⑤抑制效应细胞产生直接的抗炎效应。抗原刺激B细胞活化和分泌Ig E需要T细胞辅助。阻断T细胞的活化，可改变Th0向Th1、Th2型淋巴细胞的分化，进而减少Th2细胞的细胞因子产生。上调Th1型细胞因子的表达，阻断Th2型细胞因子的表达。IL-12的产生在发病的各个环节都有一定的调节作用。它诱导Th0向Th1分化而抑制Th2细胞因子的产生。目前研究认为与变应性鼻炎有关的免疫球蛋白主要为Ig E和Ig G1。给予IFN-γ一方面抑制Th2细胞分泌IL-4，下调Ig E合成，另一方面促使免疫球蛋白发生类型转换，合成Ig G2a，间接抑制Ig E产生。IL-12也可促进B细胞Ig产生和I g类型转换，由Ig M转为Ig G，抑制IL-4促进B细胞合成Ig E。IL-4可直接诱导Ig M转换成Ig E，或经Ig G再转换为Ig E。