[发明专利]一种香菇多糖的提取方式

权利要求书

1.一种香菇多糖的提取方式，其特征在于，包括以下步骤：

S1，材料准备：在市场上购买足量的干鲜香菇，以及氯化胆碱、丙三醇和K2HPO4，购买的干鲜香菇洗净切块；

S2，香菇多糖水提液的制备：取S1中切块的干鲜香菇，而后进行适当粉碎，加入适量的自来水，再采取水浴回流提取，提取完成后，抽滤得香菇多糖水提液，放置于冰箱冷藏室备用；

S3，氯化胆碱/丙三醇低共熔溶剂的合成：取氯化胆碱适量和丙三醇适量，两者物质的量比为1:2，置于干燥器皿中进行混合，水浴锅恒温加热并配合机械搅拌，得无色透明液体即可，存放在室温环境下进行存储备用；

S4，K2HPO4溶液的配制：取一定量K2HPO4溶于蒸馏水中，配制成K2HPO4溶液；

S5，氯化胆碱/丙三醇-盐双水相体系的构建：向试管中倒入一定量的S3中合成的氯化胆碱/丙三醇低共熔溶剂，再加入适量S4中配置的K2HPO4溶液，而后进行均匀摇晃，保持外界温度不变，观察是否成为清晰的两相，两相清洗的则构建成功，若两相不清晰，则冲洗配置氯化胆碱/丙三醇与K2HPO4溶液，直至两相清晰，保留两相清晰的氯化胆碱/丙三醇低共熔溶剂和K2HPO4溶液备用；

S6，蛋白质的脱除：向带有刻度的离心管中加入S3中的氯化胆碱/丙三醇和S4中的K2HPO4溶液，以及S2中的香菇多糖水提液，再经过离心机进行离心处理，操作结束后将离心管取出待两相完全分离。

2.根据权利要求1所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S1中处理后的的香菇存放在保鲜盒中至于低温环境下存放备用，所述的低温环境其温度控制在1℃至4℃的范围内。

3.根据权利要求1所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S2中水浴回流提取时间控制在2h，其冰箱的冷藏室温度控制在-2℃至-4℃。

4.根据权利要求1所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S3中水浴锅的温度设定为80℃，其中的机械搅拌的时间控制在30min。

5.根据权利要求4所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S4中制得到的K2HPO4溶液存放在室温环境中进行存储备用。

6.根据权利要求1所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S6中离心机设定离心机的转速设为2000r/min离心萃取时间为30min。

7.根据权利要求1所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中S6中制得的双相液个提取一定量，分别存放在不同的两个器皿中，而后采用苯酚-硫酸显色法来测定多糖，以及采用考马斯亮蓝法测定蛋白质，而后在两个上相液中分别滴入浓硫酸以及考马斯亮蓝G-250，而后再将滴入浓硫酸的器皿内滴入苯酚，观察若是上相液中的溶液中滴入苯酚的器皿中显色则上相液为需要提取的多糖，反之若是滴入考马斯亮蓝G-250的器皿中显青色，则上相液为蛋白质，下相液为需要提取的多糖。

8.根据权利要求7所述的一种香菇多糖的提取方式，其特征在于：其中多糖等物质在浓硫酸的作用下，糖苷键断裂，多糖水解成单糖，单糖脱水生成糠醛及其衍生物，这些物质再与苯酚作用生成有色物质，考马斯亮蓝G-250自身为红色，在465nm波长下有最大吸光值，当与蛋白质结合的时候，它的颜色由红色转变为青色。