[发明专利]检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症G6PD基因突变的引物、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201910640857.2 | 申请日： | 2019-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN110358821A | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 林筱剑 | 申请（专利权）人： | 上海艾迪康医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 黎双华 |
| 地址： | 200237 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 检测葡萄糖 磷酸脱氢酶 缺乏症 基因突变 检测结果 快速检测 快速诊断 位点突变 相关基因 试剂盒 可用 扩增 位点 突变 体内 参考 | ||
1.检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症G6PD基因突变的引物，其特征在于，G6PD基因突变位点是c.1376,c.1388位点，所述引物包括：扩增G6PD的c.1376,c.1388位点的扩增引物G6PD-F、G6PD-R和测序引物M13F、M13R，其碱基序列为：
G6PD-F:TGTAAAACGACGGCCAGTGCAGCCGTCGTCCTCTATG
G6PD-R:AACAGCTATGACCATGCACCTGCCATAAATATAGGGGAT
M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R：AACAGCTATGACCATG。
2.检测G6PD基因c.1376,c.1388位点突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)抽提外周血中的基因组DNA；
(2)利用扩增引物G6PD-F、G6PD-R对步骤(1)中提取的DNA进行扩增，获得扩增产物；
G6PD-F:TGTAAAACGACGGCCAGTGCAGCCGTCGTCCTCTATG
G6PD-R:AACAGCTATGACCATGCACCTGCCATAAATATAGGGGAT
(3)利用测序引物M13F、M13R对步骤(2)中的扩增产物进行测序；
M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R：AACAGCTATGACCATG
(4)对测序结果进行判断，通过判读G6PD基因c.1376,c.1388位点的测序图中是否有双峰来判断G6PD基因是否发生突变。
3.检测G6PD基因c.1376,c.1388位点突变情况的试剂盒，所述试剂盒包括检测体系PCR扩增反应液、测序体系反应液，其特征在于，所述检测体系PCR扩增反应液包括一对扩增引物G6PD-F、G6PD-R，所述测序体系反应液包括一对测序引物M13F、M13R，其序列为：
G6PD-F:TGTAAAACGACGGCCAGTGCAGCCGTCGTCCTCTATG
G6PD-R:AACAGCTATGACCATGCACCTGCCATAAATATAGGGGAT
M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R：AACAGCTATGACCATG。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述检测体系PCR扩增反应液还包括2×PCR Buffer、dNTPs和KOD FX DNA聚合酶。
5.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述测序体系反应液还包括EDTA、无水乙醇、75％乙醇、HIDI和Bigdye Terminator V3.1。
6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述测序体系反应液还包括测序纯化液，所述测序纯化液包括核酸外切酶I和牛小肠碱性磷酸酶。
7.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海艾迪康医学检验所有限公司，未经上海艾迪康医学检验所有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910640857.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
