[发明专利]一种制备ADAMTSL-3/punctin-2多克隆抗体的方法有效
| 申请号： | 201910642115.3 | 申请日： | 2019-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN110357957B | 公开（公告）日： | 2021-04-02 |
| 发明（设计）人： | 涂海军 | 申请（专利权）人： | 湖南大学深圳研究院 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K19/00 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘伟 |
| 地址： | 518054 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 adamtsl punctin 克隆 抗体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备ADAMTSL-3/punctin-2多克隆抗体的方法，小鼠Punctin-2多肽片段与载体蛋白偶联，偶联后的多肽免疫动物收集血清；
其中，所述小鼠Punctin-2多肽片段的氨基酸序列为cys-GKTERVPKNPTVKNS或CRTSEGNDNSWEFKN。
2.根据权利要求1所述的方法，所述载体蛋白为血蓝蛋白。
3.根据权利要求1所述的方法，所述免疫的动物为新西兰大白兔。
4.根据权利要求1所述的方法，所述免疫的方法为偶联后的多肽用1×PBS溶解后与等体积弗氏佐剂混合后分次免疫新西兰大白兔。
5.根据权利要求4所述的方法，所述免疫新西兰大白兔每次免疫的时间、剂量及弗氏佐剂种类具体为
免疫次数 免疫时间 免疫剂量 免疫佐剂 首次免疫 0天 2mg 弗氏完全佐剂 二次免疫 14天 1mg 弗氏不完全佐剂 三次免疫 35天 1mg 弗氏不完全佐剂 四次免疫 52天 1mg 弗氏不完全佐剂 五次免疫 64天 1mg 弗氏不完全佐剂
。
6.根据权利要求1所述的方法，还包括纯化步骤。
7.根据权利要求6所述的方法，所述纯化具体为通过HiTrap ProteinA HP纯化柱，借助AKTA 900蛋白纯化仪进行纯化。
8.根据权利要求7所述的方法，纯化过程中收集穿透峰处的洗脱液。
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