[发明专利]促卵泡生成素受体活性检测试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201910643755.6 | 申请日: | 2019-07-17 |
公开(公告)号: | CN112239780A | 公开(公告)日: | 2021-01-19 |
发明(设计)人: | 郑超;吴祚达;陈素华 | 申请(专利权)人: | 新开源博畅(武汉)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 430205 湖北省武汉市东湖开*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 卵泡 生成 受体 活性 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括两对扩增引物、多重PCR混合反应液,其中扩增引物用于扩增肥胖基因多态性位点,包括rs6165位点和rs6166位点,每对引物分别对应一个SNP位点的上下游区域。
2.根据权利要求1所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,所述rs6165位点的扩增引物序列如序列表SEQ ID NO:1~2所示。
3.根据权利要求1所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,所述rs6166位点的扩增引物序列如序列表SEQ ID NO:3~4所示。
4.根据权利要求1所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,所述多重PCR混合反应液包括DNA聚合酶、Mg2+和dNTPs。
5.根据权利要求4所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,多重PCR混合反应液中还包括PCR稳定剂和增强剂。
6.根据权利要求1所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括全血样品PCR缓冲液,所述缓冲液含有100mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,pH9.3~9.5。
7.一种采用根据权利要求1~6任一项所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒的检测方法,其特征在于,检测时扩增体系为50μL的PCR体系,体系中同时含有rs6165位点和rs6166位点的扩增引物。
8.根据权利要求7所述的促卵泡生成素受体活性检测方法,其特征在于,扩增体系具体为:
2×Platinum Multiplex PCR Master Mix 25μL;
模板2μL;
rs6165、rs6166上下游引物(10μmol/L)各1μL;无菌双蒸水补齐至50μL。
9.根据权利要求7所述的促卵泡生成素受体活性检测方法,其特征在于,反应条件为95℃预变性10min;然后94℃变性30s,60℃退火90s,72℃延伸60s,35个循环后,再次72℃延伸10min,恢复至4℃。
10.根据权利要求1~9任一项所述的促卵泡生成素受体活性检测试剂盒及其检测方法的应用,其特征在于,所述检测试剂盒及检测方法在检测促卵泡生成素受体活性中的应用。
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