[发明专利]一种混合发酵培养丁酸梭菌的方法

说明书

本发明提供了一种混合发酵培养丁酸梭菌的方法，属于微生物培养技术领域，所述方法包括以下步骤：将丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的单菌培养液混合进行混合培养；所述混合培养的温度为29℃，所述混合培养的pH值为6.4～6.8，所述混合培养的时间为16～20h，所述混合培养的转速为150～170rpm；所述丁酸梭菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌和乳酸菌混合的数量比例为1:1:3:1。所述方法操作简单，培养获得的丁酸梭菌的生物量显著提高，生物活性也大大提升。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，尤其涉及一种混合发酵培养丁酸梭菌的方法。

背景技术

科技的飞速发展使得人类的生活水平显著提升，日渐凸显的环保和食品安全问题越来越受到人们的重视。早前受养殖业、饲料业所热捧的抗生素正逐步被更为绿色、安全的微生态制剂所替代。丁酸梭菌作为新型微生态制剂大家族中的一员，无论是对养殖业还是其他相关产业均有非常广阔的市场前景。

丁酸梭菌是一种存在于人类和动物肠道中的非常住、产芽孢益生菌，亦广泛分布在树叶、土壤、奶酪以及天然酸奶中，具有耐热(80℃、30min的热处理下不会失活)、耐酸(在体内可以耐受胃液、胆汁酸和消化液的作用)和耐多种抗生素(仅对万古霉素、四环素等少数抗生素敏感)的生物学特性。丁酸梭菌还能够调节肠道的微生态平衡，早在1999年，赵熙等就发现丁酸梭菌具有增殖肠道内有益菌并抑制有害菌的作用。在对提高养殖业产能和饲料利用率、增强饲养畜禽免疫力以及治疗动物因大肠杆菌等有害菌所引起的腹泻等方面上，丁酸梭菌均有显著的效果。

丁酸梭菌在体外室温下能长期保存，但难以纯培养，从而导致其发酵生物量普遍不高。而混合培养则能产生优于细菌纯培养时的效果，能显著提高菌株的生理代谢功能、对有害菌的拮抗作用以及生物产量。目前对丁酸梭菌混合发酵培养的研究较少，培养所获得的生物产量也无显著提高。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种混合发酵培养丁酸梭菌的方法，所述方法操作简单，培养获得的丁酸梭菌的生物量显著提高，生物活性也大大提升。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种混合发酵培养丁酸梭菌的方法，包括以下步骤：

将丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的单菌培养液混合进行混合培养；所述混合培养的温度为29℃，所述混合培养的pH值为6.4～6.8，所述混合培养的时间为16～20h，所述混合培养的转速为150～170rpm；

所述丁酸梭菌的单菌培养液中丁酸梭菌的活菌浓度为(5～7)×10⁷CFU/mL，所述枯草芽孢杆菌的单菌培养液中枯草芽孢杆菌的活菌浓度为(1.5～2.5)×10⁷CFU/mL，所述酵母菌的单菌培养液中酵母菌的活菌浓度(0.5～1.5)×10⁸CFU/mL，所述乳酸菌的单菌培养液中乳酸菌的活菌浓度为(0.5～1.5)×10⁸CFU/mL；

所述丁酸梭菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌和乳酸菌单菌培养液混合的体积比例为1:1:3:1。

优选的，所述混合培养的pH值为6.5。

优选的，所述混合培养的转速为160rpm。

优选的，所述丁酸梭菌的单菌培养液中丁酸梭菌的活菌浓度为(5.9～6.2)×10⁷CFU/mL。

优选的，所述枯草芽孢杆菌的单菌培养液中枯草芽孢杆菌的活菌浓度为(1.9～2.1)×10⁷CFU/mL。

优选的，所述酵母菌的单菌培养液中酵母菌的活菌浓度(0.9～1.1)×10⁸CFU/mL。