[发明专利]一种用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物，其特征在于，包括如下质量份的组分：大麻二酚1～5份、葛根素1～3份、总丹参酮1～3份、磷酸川穹嗪1～2份、卵磷脂20～80份、豆油30～100份、吐温8020～60份、多聚赖氨酸1～10份、甘油100～800份和去离子水1～200份。

2.根据权利要求1所述一种用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物，其特征在于，包括如下质量份的组分：大麻二酚3份、葛根素2份、总丹参酮2份、磷酸川穹嗪1份、卵磷脂55份、豆油70份、吐温8060份、多聚赖氨酸7份、甘油700份和去离子水100份。

3.一种如权利要求1或2所述用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、由汉麻中提取四氢大麻酚：

(1)将汉麻茎、汉麻叶、汉麻花和/或汉麻籽高压灭菌、冷却、干燥后粉碎至40目待用；

(2)哈茨木霉活化后接入液体种子培养基，一定温度下培养得到哈茨木霉种子液，按一定料液比取灭过菌的汉麻粉与马铃薯葡萄糖液体培养基混匀，接入哈茨木霉种子液，混匀后置于一定温度和相对湿度下固体培养一定时间，得到哈茨木霉发酵培养物，将所得哈茨木霉发酵培养物高压灭菌，冷却、充分干燥并粉碎后待用；

(3)多粘芽孢杆菌活化后接入MRS培养基，一定温度下摇床培养得到多粘芽孢杆菌种子液，按一定料液比取灭过菌的哈茨木霉发酵培养物与营养肉汤培养基混匀，接入多粘芽孢杆菌种子液，混匀后置于一定温度和相对湿度下固体培养一定时间，得到多粘芽孢杆菌发酵培养物，将所得多粘芽孢杆菌发酵培养物高压灭菌，冷却后用95％乙醇充分洗涤，离心收集上清液，将离心沉淀用95％乙醇充分洗涤，离心收集上清液，合并所得上清液待用；

(4)将所得上清液减压浓缩，以大孔吸附树脂为层析介质，按一定大孔吸附树脂与浓缩液体积的料液比向大孔吸附树脂中添加浓缩后的上清液，一定温度下完成吸附，用45～55％的乙醇洗脱去除极性杂质，再用80～95％的乙醇洗脱大麻二酚，收集富含大麻二酚的洗脱液，减压浓缩得到大麻二酚浓缩液；所得大麻二酚浓缩液用硅胶层析柱进一步纯化，以石油醚为流动相，以一定流动相流速进行等度洗脱，收集富含大麻二酚的洗脱液，减压浓缩得到大麻二酚纯化液，将所述大麻二酚纯化液进行真空干燥，得到白色大麻二酚固体；

步骤二、制备磷脂复合体：

将大麻二酚、葛根素、总丹参酮、磷酸川芎嗪和卵磷脂分别溶于无水乙醇中，再将大麻二酚、葛根素、总丹参酮、磷酸川穹嗪和卵磷脂的醇溶液进行混合，以一定转速搅拌均匀后，在一定超声功率下对混合溶液超声分散处理一定时间，然后将所得溶液进行冷冻干燥处理，得到磷脂复合体；

步骤三、制备油相混合液；

将步骤一所得磷脂复合体、大豆油、吐温80和多聚赖氨酸进行混合并在一定转速条件下高速剪切，直至混合液中无肉眼可见固形物即得到油相混合液；

步骤四、制备用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物；

将甘油和去离子水加入步骤二制得的油相混合液中，在一定转速条件下高速剪切一定时间，所得乳化液经一定压力的高压均质循环处理，得到透明乳状的用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物。

4.根据权利要求3所述一种用于治疗神经性耳鸣的含有大麻二酚的组合物的制备方法，其特征在于，步骤一(2)所述哈茨木霉种子培养条件为25℃培养48h，所述哈茨木霉种子液的菌丝浓度为200～250g/L；所述灭过菌的汉麻粉与马铃薯葡萄糖液体培养基的料液比为1:1，所述哈茨木霉种子液的接入量为灭过菌的汉麻粉与马铃薯葡萄糖液体培养基混合料质量的5～10％；所述固体培养的温度为28℃，相对湿度为92％，培养时间为5d，所述高压灭菌为120℃灭菌锅中灭菌40min，所述粉碎为粉碎至40目。