[发明专利]一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤后的长链非编码RNA及其引物和试剂盒

说明书

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤后的长链非编码RNA及其引物和试剂盒，所述长链非编码RNA为ENST00000542697。本发明基于微滴式数字PCR技术鉴定多环芳烃暴露人群血浆样本中特定的一种LncRNA表达量的差异变化，及早准确评估多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的风险，公开检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的生物标记物LncRNA的试剂盒，试剂盒中包含的LncRNA的引物探针和相关试剂。本发明提供的分子标记可以快速检测出与多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的风险的LncRNA，结果准确可靠，及早发现人群在多环芳烃暴露的情况下氧化应激严重程度，及时采取相关措施提供科学依据。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤后的长链非编码RNA及其引物和试剂盒。

背景技术

多环芳烃是煤，石油，木材，烟草，有机高分子化合物等有机物不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，是重要的环境和食品污染物，广泛分布于环境中，与日常工作和生活息息相关。除了我们所熟知的致癌、致突变以及致心血管损伤外，长期接触多环芳烃可使体内氧化应激水平增加。

8-羟基脱氧鸟苷是一种重要的DNA氧化损伤的生物标志物，8-异前列腺素-F2α则是脂质过氧化的可靠生物标志物结合，这两者可用来代表人体的氧化应激水平。长期接触多环芳烃的暴露人群会出现8-羟基脱氧鸟苷和8-异前列腺素-F2α的增高，因此对氧化应激损害进行快速、准确的诊断具有重要的临床意义。

LncRNA是基因转录组的重要组成部分，其长度大于200个核苷酸，且不具有蛋白质编码功能。LncRNA广泛表达于免疫细胞中，参与免疫细胞分化与活化，通过激活或抑制转录因子，调节信使核糖核酸和微小RNA(microRNA)的稳定性，从而参与多种疾病发生。LncRNA通常会形成较为稳定的二级结构，为在血浆中检测LncRNA提供了可能性，通过检测外周血循环系统中异常表达的LncRNA有望成为某些疾病的早期诊断依据，具有潜在的临床价值。

综上所述，目前有必要探寻新的有效的非编码RNA作为多环芳烃暴露人群氧化应激损伤检测的标记物，为诊断多环芳烃暴露人群氧化应激损伤提供依据。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤后的长链非编码RNA及其引物和试剂盒，可以快速检测出与多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的风险的相关LncRNA，结果准确可靠。

本发明提供的技术方案：一种基于微滴式数字PCR定量检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤后的长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为ENST00000542697，所述ENST00000542697的核酸序列如SEQ ID NO:1所示。

一种长链非编码RNA在检测多环芳烃暴露人群氧化应激期损伤的分子标志物中的用途。

一种引物，用于检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的ENST 00000542697的长链非编码RNA表达水平，ENST 00000542697的上游引物核苷酸序列为：5'-AAATGGGCTAACACTGAAAGAACC-3'，下游引物核苷酸序列为：5'-CCTGCCGAGGCTTGGATTAC-3'。

一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的试剂盒，包含上述的引物。

一种检测多环芳烃暴露人群氧化应激损伤的试剂盒，所述试剂盒还包括内参基因β-actine的引物和探针序列、ENST00000542697的探针序列；

内参基因β-actine的上游引物序列：5’-CATCCTCACCCTGAAGTA-3’，

内参基因β-actine的下游引物序列：5’-AGGTCTCAAACATGATCTG-3’，