[发明专利]热带假丝酵母菌突变株及其在BCAA制备中的应用

权利要求书

1.热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）突变株，保藏编号为 CGMCC No.17928。

2.高纯度 BCAA 的生产方法，包括对 BCAA 反应液进行后处理的步骤，其特征在于，所述的后处理包括将权利要求 1 所述的热带假丝酵母菌突变株菌体接种入BCAA 发酵液中进行培养的除杂酸的步骤；其中，所述的杂酸是 L-丙氨酸和 L-谷氨酸。

3.根据权利要求 2 所述的方法，其特征在于，所述的除杂酸的步骤是：将BCAA发酵液的pH调至6.0，接入热带假丝酵母菌突变株菌体；初始时，体系OD=4~6，然后在30±2℃条件下培养，DO控制在30~50%，pH控制在5.5-6.0；培养结束后，离心并分别收集滤液和菌体。

4.根据权利要求 3 所述的方法，其特征在于，所述的菌体重复使用。

5.根据权利要求 3 所述的方法，其特征在于，所述的后处理还包括对除杂酸步骤后所获得的滤液进行纳滤膜除盐及蒸发结晶的步骤。

6.根据权利要求 2 所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1) 除杂酸

将 BCAA 发酵液调 pH至6.0，接入热带假丝酵母菌突变株菌体，使初始OD=5，然后于30±2℃条件下培养，培养过程控制溶氧量30~50%，pH值 5.5~6.0；培养结束后，离心并分别收集滤液和菌体；

(2) 除盐、结晶

步骤(1)所得滤液经截留分子量400 Da纳滤膜除盐，减压蒸馏至有大量固体析出，降温过滤，固体在 50℃减压烘干得 BCAA 纯品。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的热带假丝酵母菌突变株菌体通过下述方法制备：取一环活化的热带假丝酵母菌突变株接入装有 50 ml YPD 培养基的锥形瓶中，置于 30℃、220 rpm 摇床中培养 16h；然后取 1 ml 培养液接入另一盛有 50 ml YPD培养基的锥形瓶中，置于 30℃、 220 rpm 摇床中培养 20 h，离心收集菌体。