[发明专利]PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位多肽及其筛选与应用

权利要求书

1.PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位的多肽序列，其特征在于：包括两条多肽，其氨基酸序列分别为：

PCV3 Cap 47-62：NVISVGTPQNNKPWHA；

PCV3 Cap 136-149：TSKKKHSRYFTPKP；

上述氨基酸的核苷酸序列分别为：

PCV3 Cap 47-62： aacgtcattt ccgttggaac ccctcagaat aacaagccct ggcacgcc 48；

PCV3 Cap 136-149： acttctaaaa aaaaacacag ccgttacttc acccccaaac ca 42。

2.PCV3 Cap 蛋白B细胞线性抗原表位，其特征在于：具有权利要求1所述多肽的氨基酸序列。

3. 根据权利要求2所述的PCV3 Cap 蛋白B细胞线性抗原表位，其特征在于：所述表位为含Alpha、Beta、Turn、coil结构中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位的多肽序列的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）根据NCBI上边公布的已知PCV3 Cap蛋白的氨基酸序列，比对分析PCV2与PCV3结构蛋白的主要差别，观察其氨基酸的保守性；

（2）通过DNAstar 7.0软件包中Protean模块Gamier-Robson法和Chou-Fasman法及在线网站SOPMA法对PCV3 Cap蛋白二级结构特征进行了预测；同时采用Kyte-Doolitt法、Emini法和Jameson-Wolf法对蛋白质骨架的亲水性区域、表面可及性、柔韧性和高抗原指数区域进行预测；

（3）借助抗原表位预测在线网站http://tools.iedb.org/bcel对 PCV3 Cap 蛋白B细胞线性抗原表位进行预测，同时使用 https://webs.iiitd.edu.in/raghava/abcpred/ABC_submission.html网站对 PCV3 Cap 的抗原表位进行预测；

（4）通过对DNAstar软件预测结果和在线网站预测的表位信息序列综合分析，为了最大限度地覆盖PCV3 Cap的抗原表位信息，采用随机重叠方式，少许多肽序列相互重叠，最终获得 12 个表位多肽信息，交由吉尔生化上海有限公司合成，多肽合成纯度大于 95%并用BSA偶联；

（5）使用PCV3 Cap 单克隆抗体与抗原表位多肽进行结合反应，筛选出于单抗特异性结合的短肽，获得两个PCV3 Cap 的B细胞线性抗原表位，所获得的表位为含Alpha、Beta、Turn、coil结构中的至少一种，富含正电荷，亲水性强，表面可及性强，抗原指数高；

两条多肽的氨基酸序列分别为：

PCV3 Cap 47-62：NVISVGTPQNNKPWHA；

PCV3 Cap 136-149：TSKKKHSRYFTPKP。

5.根据权利要求2所述的多肽序列的筛选方法，其特征在于：步骤（4）所述的获得 12个表位多肽信息为：

。

6.权利要求1所述的多肽序列在制备PCV2与PCV3型鉴别诊断试剂盒中的应用。

7.权利要求1所述的多肽序列在制备PCV3亚单位疫苗中的应用。

8.权利要求1所述的多肽序列在制备治疗PCV3抗体中的应用。