[发明专利]一种水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）通过生物信息学分析水稻Oryza sativa subsp.japonica.Nipponbare基因OsPIN1b的LOC_Os02g50960或Os02g0743400表达的蛋白OsPIN1b；

2）从蛋白OsPIN1b中选取第244-258位的15个氨基酸作为合成多肽的氨基酸序列，在此基础上把第258位氨基酸由H→C，突变后的氨基酸序列为QSSRNPTPRGSSFNC；

3）按照步骤2）中的多肽序列合成多肽；

4）将多肽与载体偶联后得到多肽抗原；

5）将多肽抗原注射入新西兰白兔，初次免疫后，进行3次加强免疫，经血清分离纯化获得水稻生长素输出蛋白OsPIN1b多克隆抗体，所述抗体IgG浓度为0 .51mg/mL；

6）间接ELISA法对多克隆抗体的效价进行评价。

2.如权利要求1所述的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法制备的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体应用于免疫印迹。

3.如权利要求1所述的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法制备的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体应用于检测水稻、玉米、马铃薯、小麦、大豆中生长素输出蛋白PIN1在根尖、胚、叶片表皮细胞及细胞膜中的细胞定位及分布规律。

4.如权利要求1所述的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法制备的水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体应用于检测水稻、玉米、马铃薯、小麦、大豆中生长素输出蛋白PIN1的细胞胞吞。