[发明专利]一种快速检测覆土中双孢蘑菇疣孢霉病病原菌的引物及方法有效
| 申请号： | 201910652794.2 | 申请日： | 2019-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN110241249B | 公开（公告）日： | 2021-03-05 |
| 发明（设计）人： | 周雁;李佳璐;边银丙 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 江丽丽;王敏锋 |
| 地址： | 430074 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 覆土中双孢 蘑菇 疣孢霉病 病原菌 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.快速检测覆土中双孢蘑菇疣孢霉病病原菌的引物，其特征在于 ，引物序列如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.利用权利要求1所述的引物检测覆土中双孢蘑菇疣孢霉病病原菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）采集双孢蘑菇覆土，提取土壤总DNA；
（2）以土壤总DNA为模板，使用权利要求1所述的引物进行PCR扩增；
（3）将扩增产物进行核酸电泳检测，若扩增产物的长度为326bp，则覆土中存在疣孢霉病原菌。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中双孢蘑菇覆土在PDA液体培养基中扩大培养后再提取土壤总DNA。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，PCR 程序为95℃预变性5 min，95℃变性30s，57℃退火30 s，72℃延伸1 min，35个循环，72℃延伸10 min，4℃保存。
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