[发明专利]一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法

权利要求书

1.一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法，其特征在于包括如下步骤：

1)预处理，含有免疫球蛋白的血液样品，加抗凝剂，离心取上清液，得到上样粗品溶液；

2)层析分离，调节上样粗品溶液的pH至6.0～9.0，稀释率为0～3.0，用0.45μm滤膜过滤，上样到填充有以磺胺吡啶为配基的混合模式介质的层析柱中，平衡缓冲液冲洗，洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰对应的流出液，得到人抗体溶液；

3)脱盐和干燥，将人抗体溶液脱盐，冷冻干燥，得到纯度大于95％的人抗体；

所述的混合模式介质为磺胺吡啶作为配基的层析介质；

所述的磺胺吡啶为4-氨基-N-(2-吡啶基)苯磺酰胺或3-氨基-N-吡啶-3-甲基苯磺酰胺。

所述的平衡缓冲液pH值为6.0～9.0；

所述的洗脱缓冲液pH值为3.0～5.0。

2.如权利要求1所述的一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法，其特征在于所述的含有人免疫球蛋白的血液样品为人血液，或者去除血细胞的血浆，或者去除血细胞和纤维蛋白原的血清。

3.如权利要求1所述的一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法，其特征在于所述的平衡缓冲液为磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液或Tris-盐酸缓冲液。

4.如权利要求1所述的一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法，所述的洗脱缓冲液为乙酸-乙酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液或者甘氨酸-盐酸缓冲液，所述的洗脱缓冲液中添加有0-0.1 M NaCl。

5.如权利要求1所述的一种从血液中分离抗体的混合模式层析方法，其特征在于所述的步骤2)中上样粗品溶液的pH调节所用酸溶液为乙酸或柠檬酸溶液，所用碱溶液为氢氧化钠溶液。

6.如权利要求1所述的一种从血液中分离抗体的混合模式层析方法，其特征在于所述的步骤2)中上样粗品溶液的稀释率调节所用溶液为与调节完pH后的上样粗品溶液相同pH的缓冲溶液，所述的缓冲溶液为磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液或Tris-盐酸缓冲液。