[发明专利]不同外观表型金线莲中黄酮成分的检测方法

权利要求书

1.一种金线莲中黄酮成分的检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，具体包括如下操作步骤：

1)对照品溶液的制备：取黄酮类对照品，加甲醇溶解，即得；

2)供试品溶液的制备：取金线莲粉末，过筛，加甲醇提取，离心，取上清液，即得；

3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：C₁₈色谱柱；流动相:以0.1-0.3％甲酸乙腈为流动相A，以0.1-0.3％甲酸水为流动相B相；梯度洗脱程序如下：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤1)所述黄酮类对照品为芦丁、水仙苷、槲皮素、山柰酚和/或异鼠李素。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液为每1mL含45-50μg芦丁、50-70μg水仙苷、25-30μg槲皮素、10-15μg山柰酚和/或5-10μg异鼠李素；优选每1mL含49.44μg芦丁、60.06μg水仙苷、28.5μg槲皮素、12.35μg山柰酚和/或7.884μg异鼠李素；所述甲醇为50-100％甲醇，优选50％甲醇。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤3)所述C₁₈色谱柱为UHPLCAQ-C18色谱柱，规格2.1mm×100mm，1.8μm。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤3)所述色谱条件的柱温为38℃，波长为368nm，流速为0.3mL·min^-1，进样量5μL。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述金线莲粉末过4号筛，所述金线莲粉末与甲醇的质量体积比为1：(40-60)g/ml，优选1：50g/ml；所述甲醇为80-100％甲醇，优选80％甲醇。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述提取为超声提取，提取功率350W，频率50Hz，时间30min。

8.一种金线莲中黄酮成分含量测定方法，其特征在于：它是采用一测多评的方法进行检测，以芦丁、水仙苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素中的任意一种为内参物，先根据权利要求1～7任意一项所述方法检测待测样品中内参物的含量，再使用相对矫正因子计算其余成分的含量。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于：所述相对校正因子按照下述方法得到：

取芦丁、水仙苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素对照品，根据权利要求1～5任意一项所述方法检测，根据如下公式计算：

f_s/i＝f_s/f_i＝A_s×C_i/(A_i×C_s)；式中A_s为内参物s峰面积，C_s为内参物s浓度，A_i为组分i峰面积，C_i为组分i浓度。

10.根据权利要求8或9所述方法，其特征在于：以水仙苷为内参物，水仙苷与芦丁的相对矫正因子为1.016，水仙苷与槲皮素的相对矫正因子为0.4650，水仙苷与山柰酚的相对矫正因子为0.4228，水仙苷与异鼠李素的相对矫正因子为0.4539。