[发明专利]一种利用复合酶从珍珠粉中提取小分子活性肽的方法

说明书

本发明公开了一种利用复合酶从珍珠粉中提取小分子活性肽的方法：将珍珠粉加入到酸溶液中进行酸解，收集上清液和第一不溶性蛋白；对第一不溶性蛋白进行水冲泡后离心得到第二上清液和第二不溶性蛋白；合并第一上清液和第二上清液；对合并后的第一上清液和第二上清液进行真空热浓缩析出乳酸钙，过滤后与第二不溶性蛋白混合，匀浆制成匀浆液；使用复合蛋白酶液对匀浆液在弱酸性条件下进行酶解，得到酶解液，所述复合蛋白酶液包括胰蛋白酶液、木瓜蛋白酶液和角蛋白酶液；对酶解液进行脱色和灭菌，制成液体或粉末形态的小分子活性肽。本发明提供的方法所提取出来的小分子活性肽具有高活性和针对性，对酪氨酸酶抑制率高，具有美白功效。

技术领域

本发明属于珍珠粉技术领域，特别涉及一种利用复合酶从珍珠粉中提取小分子活性肽的方法。

背景技术

珍珠是珍珠贝类和珠母贝类软体动物体内分泌作用而生成的含碳酸钙的矿物珠粒，由大量微小的文石晶体集合而成。珍珠粉既是一种用于装饰的珍宝，又是一种宝贵的中药材和化妆品。我国明朝著名医学家李时珍在《本草纲目》中记载:“珍珠主治：镇心。点目，去肤黯障膜。涂面，令人润泽好颜色；涂手足，去皮肤逆肿。”珍珠粉由无机成分与有机成分结合而成，其中有机成分主要是蛋白质。蛋白质是由肽组成的，而肽又是由氨基酸组成的。氨基酸一共有22种，其中有一部分是含硫氨基酸(SAA)，主要包括肤氨酸、半肌氨酸和蛋氨酸。这些氨基酸对于人体皮肤及皮肤衍生物(指甲、毛发)有着不可或缺的作用。珍珠中的主要蛋白为角蛋白。水解珍珠蛋白可产生小分子活性肽。

目前对于珍珠功效成分的开发应用相对停留在较为固定的工艺模式中，利用传统水提、酸提及酶解等方法。如公开号为CN101381400的中国专利文献公开了一种纳米珍珠有机基质萃取与分子量分级的方法，是取纳米珍珠粉先后两次加水搅拌使之充分萃取，以高速旋转离心方式取悬浮液，经杂质过滤后，通过离心浓缩滤膜装置的离心浓缩分离方式，分离出分子量大于5kDa的第一珍珠有机基质萃取物及分子量小于5kDa的第二珍珠有机基质萃取物；进一步以硫酸铵沉淀法分离出珍珠蛋白与无法沉淀出的蛋白质，并以SephadexG25凝胶依照蛋白质分子量进行层析，得到三个级分：级分A，级分B，级分C。使化妆品、食品等产业，可以由此获得有效成分被纯化的珍珠蛋白或珍珠肽作最佳利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用复合酶从珍珠粉中提取小分子活性肽的方法，提取出来的小分子活性肽具有高活性和针对性，对酪氨酸酶抑制率高，具有美白功效。

本发明提供如下技术方案：

一种利用复合酶从珍珠粉中提取小分子活性肽的方法，包括以下步骤：

(1)将珍珠粉加入到酸溶液中进行酸解，收集上清液和第一不溶性蛋白；对第一不溶性蛋白进行水冲泡后离心得到第二上清液和第二不溶性蛋白；合并第一上清液和第二上清液；

(2)对合并后的第一上清液和第二上清液进行真空热浓缩析出乳酸钙，过滤后与第二不溶性蛋白混合，匀浆制成匀浆液；

(3)使用复合蛋白酶液对匀浆液在弱酸性条件下进行酶解，得到酶解液，所述复合蛋白酶液包括胰蛋白酶液、木瓜蛋白酶液和角蛋白酶液；

(4)对酶解液进行脱色和灭菌，制成液体或粉末形态的小分子活性肽。

在步骤(1)中，将不溶性蛋白在4℃保存。

在步骤(1)中，所述珍珠粉为普通珍珠粉、超细珍珠粉或纳米级珍珠粉。在步骤(1)中，所述酸溶液选自盐酸、醋酸、乳酸或醋酸/醋酸钠溶液。

优选的，在步骤(1)中，所述珍珠粉为纳米级珍珠粉，所述酸溶液为乳酸。珍珠粉粒度越细，壳角蛋白(不溶性蛋白)的提取率越高；在相同酸浓度下，以乳酸对壳角蛋白的提取率最高。因此，在上述珍珠粉粒径和酸溶液条件下壳角蛋白的提取率最高。