[发明专利]一种裸花紫珠道地药材的次生代谢产物色谱与质谱指纹谱的表征方法有效
申请号: | 201910657483.5 | 申请日: | 2019-07-19 |
公开(公告)号: | CN110827995B | 公开(公告)日: | 2022-08-09 |
发明(设计)人: | 杨扬;李小锋;杨义芳;陈梁;邓杰仁;康兴东;章弘扬;夏淑英;任昭洁;肖绍川 | 申请(专利权)人: | 江西普正制药股份有限公司;上海药辰生物科技有限公司 |
主分类号: | G16H70/40 | 分类号: | G16H70/40 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 宋秀兰 |
地址: | 343100 江西省吉安*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫珠 道地 药材 次生 代谢 产物 色谱 指纹 表征 方法 | ||
1.一种裸花紫珠道地药材次生代谢产物的表征方法,其特征在于包括如下步骤:
色谱条件:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱,柱温15~50℃;检测波长210nm;流动相B为乙腈,流动相A为0.1%~0.5%的磷酸水溶液,梯度洗脱条件(v/v%):0min~5min,8%B~13%B,5min~15min,13%B~13%B,15min~20min,13%B~16%B,20min~35min,16%B~22%B,35min~45min,22%B~30%B,45min~50min,30%B~50%B,50min~55min,50%B~65%B,55min~65min,65%B~100%B,65min~75min,100%B~100%B;流速0.2~0.5mL/min;
供试品溶液的制备:将裸花紫珠道地药材粉碎,过30~80目筛,裸花紫珠道地药材粉末与体积质量比20~100倍量的40%~95%的甲醇水溶液混合,超声提取30~60min,提取后,冷却至15~25℃,用微孔滤膜过滤,即可;
检测:精密吸取供试品溶液1~10uL,注入超高效液相色谱仪,测定,记录色谱图,即得裸花紫珠道地药材全成分指纹谱;
指纹谱表征:采用UPLC与DAD/QTOF-MS/MS联用技术对裸花紫珠道地药材全成分指纹谱在线成分定性分析与化合物鉴定,对全成分指纹谱的成分进行归类,形成裸花紫珠道地药材的化学物质指纹谱的表征。
2.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠道地药材次生代谢产物的表征方法,其特征在于包括如下步骤:
色谱条件:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱,柱温45℃;检测波长210nm;流动相B为乙腈,流动相A为0.1%的磷酸水溶液,梯度洗脱条件(v/v%):0min~5min,8%B~13%B,5min~15min,13%B~13%B,15min~20min,13%B~16%B,20min~35min,16%B~22%B,35min~45min,22%B~30%B,45min~50min,30%B~50%B,50min~55min,50%B~65%B,55min~65min,65%B~100%B,65min~75min,100%B~100%B;
流速0.3mL/min;
供试品溶液的制备:将裸花紫珠道地药材粉碎,过30~80目筛,裸花紫珠道地药材粉末与体积质量比50倍量的80%的甲醇水溶液混合,超声提取45min,提取后,冷却至15~25℃,用0.22μm微孔滤膜过滤,即可;
检测:精密吸取供试品溶液2~5uL,注入超高效液相色谱仪,测定,记录色谱图,即得裸花紫珠道地药材全成分指纹谱;
指纹谱表征:采用UPLC与DAD/QTOF-MS/MS联用技术对裸花紫珠道地药材全成分指纹谱在线成分定性分析与化合物鉴定,对全成分指纹谱的成分进行归类,形成裸花紫珠道地药材的化学物质指纹谱的表征。
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