[发明专利]一种裸花紫珠道地药材的次生代谢产物色谱与质谱指纹谱的表征方法

说明书

本发明涉及中药药物分析技术领域，具体为一种裸花紫珠道地药材的次生代谢产物色谱与质谱指纹谱的表征方法。本发明采用UPLC建立裸花紫珠道地药材全成分指纹谱，并采用UPLC与DAD/QTOF‑MS/MS联用技术对裸花紫珠道地药材全成分指纹谱在线快速成分定性分析与化合物鉴定，形成裸花紫珠道地药材特定自然环境的化学物质最佳表型。本发明的有益效果在于：裸花紫珠道地药材全成分指纹谱方法操作简单，峰容量大，且精密度、重现性和稳定性均良好，色谱峰分离度好、分析时间短、分析效率和灵敏度高；形成的裸花紫珠道地药材特定自然环境的化学物质最佳表型，解决了市场上裸花紫珠基源应用混乱、道地药材无法表征等问题。

技术领域

本发明涉及中药药物分析技术领域，具体为一种裸花紫珠道地药材的次生代谢产物色谱与质谱指纹谱的表征方法。

背景技术

道地药材是中医药的精髓,它在传统中医药中是优质药材的代名词。道地药材的形成与中药的优良种质和特定自然环境密不可分。为此,不少道地药材在药名前多冠以地名,以示其道地产区，如西宁大黄、宁夏枸杞、川贝母等。

现代生物学认为道地药材的生物学本质为表型变异＝遗传变异+环境饰变,可见,道地药材的表型可塑性与自然环境关系密切。作为中药适应特定自然环境的最佳表型,临床疗效好、药效成分含量高是道地药材最重要的优良品质。此外,中药的道地性还包括外观性状好、高产、易贮藏、抗虫、抗病性强等诸多优良性状的全部或部分(黄璐琦，郭兰萍.环境胁迫下次生代谢产物的积累及道地药材的形成[J].中国中药杂志，2007，32(4):277.)。道地药材质量形成的研究是中药资源研究的重点和难点(孟祥才，王喜军.活性氧促进道地药材质量形成的假说及其探讨 [J].中草药,2011,42(4):799-804.)。

次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。

现代药学研究表明,药用植物的有效成分通常都是植物次生代谢产物，其含量高低与药材品质息息相关。药材质量及有效性的基础是植物的次生代谢，取决于次生产物的积累。在植物不同的器官和组织或是不同的发育时期，次生代谢产物的产生和积累量都不同，通常在胁迫条件下才能大量积累。

次生代谢过程被认为是植物在长期进化中对生态环境适应的结果，它在处理植物与生态环境的关系中充当着重要的角色。在传统中医药中,人们早已认识到环境对药材有效性的影响，药材的“道地性”就体现了这点,至今仍然对指导药用植物资源的开发和利用有着重要的借鉴意义和参考价值。

次生代谢产物积累的内在规律等为认识药用植物次生代谢有效成分变化,以及药用植物种植时有效成分控制的理论基础。次生代谢产物为有效成分的药用植物人工种植中质量控制和保持有效性的重要基础理论,是制定药用植物种植GAP和SOP规范的科学基础。以植物次生代谢理论为基础阐明药材道地性的科学内涵,将是传统中医药继续发展和传承迫切需要研究解决的重要问题。

中药指纹图谱特指中药样本经光谱或色谱等现代分析技术得到的中药组分群的特征图谱和图像，目前已成为国内外公认鉴别中药品种和评价中药质量的最有效手段之一。指纹图谱可通过不同的特性共有峰来表示，其能基本上反映中药的化学成分以及含量分布情况。值得注意的趋势是色谱指纹图谱的应用。近年来，美国Waters公司在2004年率先推出了超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography，UPLC),它采用1.7μm颗粒度的色谱柱填料。它是分离科学和技术的巨大进步，液相色谱也由此进入了全新的时代，是复杂体系中药分离分析的重要手段。与传统的采用5.0μ m颗粒度的色谱柱填料的HPLC技术相比能获更快的速度和更高的质量完成以往HPLC的工作，节省宝贵的时间和日常溶剂消耗，高分离度可以从容面对复杂组份(如天然产物或中草药等)分离的挑战，高灵敏度检测更加痕量的目标化合物，快速的分离分析大量样品，实现高通量。