[发明专利]合欢花配方颗粒HPLC特征图谱及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a、取槲皮苷、阿福豆苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含90.0μg、20μg的溶液，作为对照品溶液；

步骤b、 取干膏粉0.10~0.30 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，超声处理10分钟，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，0.45μm有机滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

步骤c、用高效液相色谱法测定所述对照品溶液和所述供试品溶液，色谱条件为：

色谱柱：WATERS Symmetry Shield C18；

流动相： A相与B相的混合溶液，梯度洗脱；

流速：0.9~1.1 ml/min；

检测波长： 286 nm；

柱温：28~32℃；

其中，步骤c中A相为乙腈， B相为0.1~0.5%乙酸，所述混合溶液中A相体积百分比为0~60%；

其中，步骤c中所述梯度洗脱程序为：

0.00~5.00min，A相：0~6%，B相：100~94%；

5.00~20.00min，A相：6~20%，B相：94~80%；

20.00~22.00min，A相：20~25%，B相：80~75%；

22.00~32.00min，A相：25~30%，B相：75~70%；

32.00~40.00min，A相：30~43%，B相：70~57%；

42.00~45.00min，A相：43~50%，B相：57~50%；

45.00~50.00min，A相：50~60%，B相：50~40%。

2.根据权利要求1所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤c中B相为0.2%~0.3%乙酸水溶液。

3.根据权利要求2所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤c中B相为0.3%乙酸水溶液。

4. 根据权利要求1所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤c中所述C 18 色谱柱的内径为4.6mm，柱长为250mm，填料粒度为5 μm。

5. 根据权利要求1所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤c中所述柱温优选30℃，所述流速优选1.0 mL/min，进样量优选10μL。

6.根据权利要求1所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤b中称样量为0.10g。

7.权利要求1~6任一所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法在合欢花配方颗粒检测中的应用。

8.根据权利要求1~6任一所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述HPLC特征图谱包括6个特征峰。

9.根据权利要求8所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述HPLC特征图谱中5号特征峰为槲皮苷，6号特征峰为阿福豆苷。

10.根据权利要求9所述合欢花配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，以5号峰槲皮苷为参照峰，各特征峰的相对保留时间为：

1号峰： 0.230±0.0115；

2号峰： 0.333±0.0167；

3号峰： 0.455±0.0227；

4号峰： 0.855±0.0427；

5号峰： 1.000±0.0500；

6号峰： 1.114±0.0557。