[发明专利]一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂及其制备方法，其步骤为菌种活化，种子液培养，固体发酵，孢子分离，固体培养基粉碎和制剂制备，得到哈茨木霉颗粒剂或可湿性粉剂。本发明在固体发酵培养基中加入中药药渣，发酵结束后将发酵产物干燥分离，得到哈茨木霉孢子粉，再将发酵培养基干燥后粉碎，加载体与孢子粉混合制成固体制剂，该固体制剂对木贼镰刀菌、接骨木镰刀菌、尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、锐顶镰刀菌等马铃薯根腐病的致病菌有很好的抑制效果，可以应用于马铃薯根腐病的防治过程，从而减少和防治马铃薯根腐病的发生，提高马铃薯的产量和质量。

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂及其制备方法。

背景技术

哈茨木霉菌作为一种生防菌可以用来预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、黑根霉、柱孢霉、核盘菌、齐整小核菌等病原菌引起的植物病害。其中由镰刀菌侵染马铃薯引起的根腐病、干腐病、枯萎病是世界性的土传真菌病害，马铃薯根腐病在育苗期和大田生长期均可发病，由多种镰刀菌引起的马铃薯镰刀菌根腐病近几年对马铃薯的生产危害严重，一般发病地块减产13％～35％，严重的成片死亡甚至绝产。马铃薯根腐病的防治一般采用化学杀菌剂进行处理，用化学药剂处理时往往存在残留问题，同时生产田中的镰刀菌不能除根，来年易复发等，因此使用哈茨木霉进行生物防治根腐病处理，环保安全有效，可进行长期防治。

目前国外已有10余个商品化的木霉制剂问世，多为木霉孢子制剂，但木霉菌在植物病害防治中仍然存在很多问题，施用后在土壤中受温度、湿度、pH等因素影响，定殖能力不够理想，难以充分发挥药效，并且木霉菌对植物的促生增产作用不够显著。

针对以上不足，国内外进行了多项研究，专利CN201811550295.4公开了一种哈茨木霉菌固体发酵方法、固体发酵产物、哈茨木霉菌剂及其制备方法和应用，能高效地防治葡萄霜霉病和葡萄灰霉病，还能有效促进葡萄生长和提高作物产量。专利CN200810154241.6公开了一种用中草药药渣发酵生防木霉的生产工艺，使用中药厂制药过程中的中药药渣作为培养基成分的一部分进行发酵生产生防木霉，以上两个专利均没有说明其得到的生防木霉活力如何，在生产上效果如何，对相关植物疾病的防治及促进增产作用不明显。

发明内容

基于以上现有技术，本发明的目的在于提供一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂及其制备方法，制备的固体制剂对木贼镰刀菌、接骨木镰刀菌、尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、锐顶镰刀菌等马铃薯根腐病的致病菌有很好的抑制效果，可以应用于马铃薯根腐病的防治过程，从而减少和防治马铃薯根腐病的发生，提高马铃薯的产量和质量。

本发明所用的菌种哈茨木霉菌M-17，保藏编号：CCTCC NO：M2018538，拉丁文名称为Trichoderma harzianum M-17，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2018年8 月13日，保藏地址为中国武汉武汉大学。

本发明采用的技术方案为：一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂，其有效成分为哈茨木霉孢子和含中药药渣的固体培养基粉碎基质。

为了更好的实现本发明，进一步的，所述哈茨木霉孢子和含中药药渣的固体培养基粉碎基质质量比为1:10～50。

为了更好的实现本发明，进一步的，所述的木霉孢子制剂的剂型为颗粒剂或可湿性粉剂。

一种用于防控马铃薯根腐病的哈茨木霉固体制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、菌种活化：将哈茨木霉出发菌株M-17菌种接种到PDA培养基斜面上，黑暗条件下，25～28℃培养5～7d；

步骤二、种子液培养：将步骤一活化好的菌种接种到灭菌的种子培养基中进行培养；

步骤三、固体发酵：将步骤二培养好的种子液接种到灭菌的固体发酵培养基中，待菌丝长满培养基得到含哈茨木霉孢子的固体发酵物，对发酵结束的进行孢子计数；