[发明专利]抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及应用有效
申请号: | 201910659840.1 | 申请日: | 2019-07-22 |
公开(公告)号: | CN110261604B | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 夏宁;刘林;邓德华;邢云;孙婷;黄雅亮 | 申请(专利权)人: | 安阳师范学院 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 安阳金泰专利代理事务所(普通合伙) 41150 | 代理人: | 王晖 |
地址: | 455000 河南省安*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗体 功能 负载 吡咯 喹啉 二氧化硅 纳米 颗粒 制备 方法 应用 | ||
1.抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的应用,所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒采用以下方法制备:将聚乙烯亚胺包裹的中孔二氧化硅纳米颗粒加入到将含有吡咯喹啉醌的磷酸缓冲溶液,震荡12小时左右;然后加入含有检测抗体的磷酸缓冲溶液,继续震荡反应1小时左右,离心洗涤,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液,于4 ℃下保存备用;使用前,用含有牛血清白蛋白的磷酸缓冲溶液稀释,其特征在于:所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒在抗原检测中的应用,所述的在抗原检测中的应用用于非疾病诊断的目的,抗原检测的应用具体方法步骤为:向链霉亲和素功能化的磁球中加入含生物素功能化的抗原的捕获抗体的磷酸缓冲溶液,反应30~60分钟,采用磁铁进行分离,用磷酸缓冲溶液洗涤,弃掉上层清液,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液;然后加入含抗原的磷酸缓冲溶液,混合震荡,孵育;磁力分离和洗涤,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液,再加入检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒和牛血清白蛋白混合溶液,震荡反应;磁力分离和洗涤,下层沉淀分散于含三(2-羧乙基)膦和三价铁离子-菲嗪络合物的磷酸缓冲溶液,用肉眼观察溶液颜色变化或者用紫外可见分光光度计测定溶液在562 nm处的吸收值。
2.根据权利要求1述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的应用,其特征在于:所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒在前列腺特异抗原的检测中的应用,具体检测步骤为:向链霉亲和素功能化的磁球中加入含生物素功能化的前列腺特异性抗原的捕获抗体的磷酸缓冲溶液,反应30~60分钟,采用磁铁进行分离,用磷酸缓冲溶液洗涤,弃掉上层清液,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液;取制备的捕获抗体修饰的磁球,加入含前列腺特异性抗原的磷酸缓冲溶液,混合震荡,孵育30分钟;磁力分离和洗涤,加入检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒和牛血清白蛋白混合溶液,所述的检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒中的抗体为前列腺特异性抗原的抗体,震荡反应30分钟;磁力分离和洗涤两次,下层沉淀分散于含三(2-羧乙基)膦和三价铁离子-菲嗪络合物的磷酸缓冲溶液,用肉眼观察溶液颜色变化,或者用分光光度计测定溶液在562 nm处的吸收值。
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