[发明专利]鉴定苜蓿种子真伪的特异分子标记及其应用

说明书

本发明公开了鉴定苜蓿种子真伪的特异分子标记及其应用，涉及农业技术领域，具体而言，分子标记在鉴定苜蓿种子中的应用中，苜蓿种子选自金花菜和紫花苜蓿中的至少一种，所述分子标记包括如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列中的至少一种。采用本申请提供的分子标记进行检测能够准确、高效地鉴定金花菜种子和紫花苜蓿种子，该技术具有准确率高、快捷简单、重复性好的优点，为金花菜大面积种植和产业化提供了良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及农业技术领域，具体而言，涉及鉴定苜蓿种子真伪的特异分子标记及其应用。

背景技术

金花菜(Medicago polymorpha)又名南苜蓿、秧草等，一年或越年生草本植物。由于其富含维生素A、C、E及多种氨基酸等营养成分，且金花菜的抗旱性、耐寒性以及抗病虫能力强，所以整个生长过程无需施农药治虫害。同时，金花菜也有较高的医药价值，据癌病预防研究所的研究表明，金花菜能够或具有辅助降血脂、抗凝血、防出血、清内热，对肿瘤有抑制作用等，因此金花菜是糖尿病和心脏病患者的佳疏。总之，金花菜生物量大、生长迅速、营养丰富、利用方式广泛，可用于菜用、绿肥、药用和饲料等多种用途。

紫花苜蓿(Medicago sativa)是一种多年生草本植物，再生性好，产量高，冬季生长旺盛，为优良饲料植物，也可作绿肥，但利用方式远不如金花菜多样，其种子价格也较金花菜种子更便宜。

紫花苜蓿是多年生草本，金花菜是一年生草本，其利用方式较紫花苜蓿更多样，种子价格也比紫花苜蓿价格高。而这两种牧草种子、叶片和幼苗在外观形态上都极其相似，很难分辨，一旦这两种牧草种子混合，将对金花菜的种植和利用造成不可挽回的损失。但目前还没有一个统一且行之有效的鉴定方法。

因此准确快速迅速区分金花菜和紫花苜蓿，保证种子纯度，对于生产和确保苜蓿的质量和产量有十分重要的意义。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供了分子标记在鉴定苜蓿种子中的应用，用于区分金花菜和紫花苜蓿的引物对、方法以及试剂盒。

本发明是这样实现的：

第一方面，分子标记在鉴定苜蓿种子中的应用，所述苜蓿种子选自金花菜和紫花苜蓿中的至少一种，所述分子标记包括如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列中的至少一种；

优选地，所述苜蓿种子为金花菜，所述分子标记为如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；

优选地，所述苜蓿种子为紫花苜蓿，所述分子标记为如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

进一步地，分子标记可以为以下三种情况：分子标记包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；分子标记包括SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；分子标记为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

第二方面，本发明实施例提供了一种用于鉴定苜蓿种子的引物对，苜蓿种子选自金花菜和紫花苜蓿中的至少一种，所述引物对能够扩增如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列中的至少一种；

优选地，所述引物对包括如SEQ ID No.3所示的上游引物和如SEQ ID No.4所示的下游引物。

第三方面，本发明实施例提供一种鉴定苜蓿种子的方法，该方法包括：所述苜蓿种子选自金花菜和紫花苜蓿中的至少一种，所述方法包括：采用如上述用于鉴定苜蓿种子的引物对，以被检测种子基因组DNA为模板进行扩增，扩增产物在150bp～200bp时判定所述检测种子为苜蓿种子。

优选地，在扩增之前还包括：对被检测种子的外部形态特征进行鉴定。