[发明专利]一种小分子探针及其制备与应用

权利要求书

1.一种式(I)所示小分子探针：

2.一种权利要求1所述小分子探针的制备方法，其特征在于所述方法为：(1)将三苯基膦，3-溴丙胺氢溴酸盐溶于乙腈中，加热回流，反应结束后，冷却至室温，离心，取固体溶于异丙醇和乙醚中重结晶，晶体干燥，得到式(1-1)所示化合物；

(2)将对羟基扁桃酸溶于无水N,N-二甲基甲酰胺，缓慢加入炔丙胺，1-羟基苯并三唑，冰浴搅拌，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N，N-二异丙基乙胺，冰浴15min后，氮气保护下室温反应完全，用乙酸乙酯萃取，有机相经水洗、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥，过滤，旋蒸除去有机溶剂得粗产物，以体积比10:1的二氯甲烷/甲醇为展开剂进行硅胶薄层层析，收集R_f值为0.4的产物，干燥，得到式(1-2)所示化合物；

(3)将步骤(2)获得的式(1-2)所示化合物和碳酸钾加入无水N，N-二甲基甲酰胺中，滴加2-硝基苄溴，室温搅拌6h后，用二氯甲烷萃取后，依次水洗、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，旋蒸除去有机溶剂得粗产物，以体积比1:2的乙酸乙酯/石油醚为展开剂进行硅胶薄层层析，收集R_f值为0.45的产物，干燥，得到式(1-3)所示化合物；

(4)将步骤(3)获得的式(1-3)所示化合物加入无水N，N-二甲基甲酰胺中，恒压滴定漏斗滴加对硝基苯基氯甲酸酯，冰浴滴加30分钟，然后加入三乙胺，室温反应5小时，二氯甲烷萃取，水洗，饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥，过滤，旋蒸除去有机溶剂得粗产物，以体积比1:1的乙酸乙酯/石油醚为展开剂进行硅胶薄层层析，收集R_f值为0.5的产物，干燥，得到式(1-4)所示化合物；

(5)将步骤(4)获得的式(1-4)所示化合物溶于二氯甲烷中，加入式(1-1)所示化合物，随后加入三乙胺，室温反应过夜，反应液加入10倍体积去离子水并用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，过滤，滤液浓缩至0.5～1g/mL后，以体积比10:1的二氯甲烷/甲醇为展开剂进行硅胶薄层层析，收集R_f值为0.38的产物，干燥，获得所述式(I)探针；

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(1)中乙腈体积用量以3-溴丙胺氢溴酸盐物质的量计为10～30mL/mmol；三苯基膦与3-溴丙胺氢溴酸盐的投料物质的量之比为1:1～2。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中N,N-二甲基甲酰胺的体积用量以对羟基扁桃酸物质的量计为0.5～2mL/mmol；对羟基扁桃酸与炔丙胺、1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N，N-二异丙基乙胺的投料物质的量之比为1:1～2:0.01～0.03:1～3:1～4。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述N，N-二甲基甲酰胺体积用量以式(1-2)所示化合物物质的量计为10-50mL/mmol；式(1-2)所示化合物和碳酸钾，2-硝基苄溴的投料物质的量之比为1:2～5:1～2。

6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(4)中所述无水N，N-二甲基甲酰胺用量以式(1-3)所示化合物物质的量计为5-8mL/mmol；式(1-3)所示化合物和对硝基苯基氯甲酸酯，三乙胺的投料物质的量之比为1:1～3:2～6。

7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(5)中所述二氯甲烷体积用量以式(1-4)所示化合物物质的量计为5-30mL/mmol；所述式(1-4)所示化合物与式(1-1)，三乙胺投料物质的量之比为1:1～5:1～6。

8.一种权利要求1所述探针在制备细胞成像试剂中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述细胞为宫颈癌细胞HeLa。

10.一种权利要求1所述探针在制备蛋白质标记试剂中的应用。