[发明专利]用于菠菜器官与非生物胁迫应答研究的内参基因及应用

权利要求书

1.一组内参基因在研究菠菜器官及非生物胁迫条件下目的基因表达模式中的应用，其特征在于，在不同器官中的所述内参基因为18s rRNA和ARF，在高温胁迫下的所述内参基因为Actin和ARF，在重金属镉胁迫下的所述内参基因为ARF和EF1α，在盐NaCl胁迫下的所述内参基因为COX和18s rRNA，在NaHCO₃胁迫下的所述内参基因为RPL和Actin，以及在Na₂CO₃胁迫下的所述内参基因为ARF和CYP。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述内参基因18s rRNA、Actin、ARF、COX、CYP、EF1α和RPL的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.7、SEQ IDNO.10、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.19所示。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述内参基因18s rRNA、Actin、ARF、COX、CYP、EF1α和RPL的特异性的正向引物和反向引物分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3、SEQID NO.5和SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12、SEQID NO.14和SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.21所示。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的应用，其特征在于，所述应用为RT-qPCR，反应条件为：反应体系为20μL，2×AceQ Universal SYBR qPCR Master Mix10μL，5倍稀释的cDNA模板1μL，10mmol/L正反向引物各0.5μL，ddH₂O8μL；反应程序为：95℃预变性3min，95℃变性15s，55℃退火15s，72℃延伸30s，40个循环，65℃-95℃检测溶解曲线。