[发明专利]一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂、检测方法及应用

权利要求书

1.一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂，其特征在于：所述试剂包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的蓝舌病病毒8型特异性引物对和探针，所述探针在引物对的扩增靶标区域内，所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列，下游引物为Seq ID No.2所示序列，所述探针为Seq ID No.3所示序列；

Seq ID No.1：5’-GAGGTTGTGATTGGAACGGCTCACACCGACGATCC-3’

Seq ID No.2：5’-GTCGTACATCATAGTATCTTGCTAGACAATATCGC-3’

Seq ID No.3：

5’-CTGTAGGGCGCAGCGCGAAGGCGTTCACACATGATCCTTTTGACCTGCA -3’

其中，SEQ ID No.3所示的探针序列中，第32个碱基修饰荧光淬灭基团-dT，第33个碱基替换为碱基类似物dSpacer，第35个碱基修饰荧光基团-dT，3’末端修饰C3 Spacer。

2.根据权利要求1所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂，其特征在于：所述荧光淬灭基团-dT为BHQ1-dT。

3.根据权利要求1所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂，其特征在于：所述荧光基团-dT为6-FAM-dT。

4.根据权利要求1-3任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂在蓝舌病病毒8型非诊断治疗目的的检测中的应用。

5.根据权利要求1-3任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂在制备蓝舌病病毒8型检测试剂盒、检测试纸条或检测芯片中的应用。

6.一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有权利要求1-3任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂。

7.根据权利要求6所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂盒，其特征在于：还包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应液、酶和反应添加剂。

8.一种蓝舌病病毒8型的非诊断治疗目的的检测方法，其特征在于：包括采用权利要求1-3任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂，或权利要求6或7所述的试剂盒，对待测样品的核酸进行一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测，并采用荧光检测仪收集荧光。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于：所述一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应条件为，40℃恒温反应15分钟。