[发明专利]一种用于脂肪间充质干细胞成脂诱导的培养基以及诱导方法

说明书

本发明公开了一种用于脂肪间充质干细胞成脂诱导的培养基以及诱导方法，该培养基包括第一培养基和第二培养基，诱导方法包括将脂肪间充质干细胞先在第一培养基中进行培养，再在第二培养基中进行培养。本发明能有效提高脂肪间充质干细胞成脂分化的效率，缩短成脂诱导时间，提高其在临床应用的可行性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于脂肪间充质干细胞成脂诱导的培养基以及诱导方法。

背景技术

长期以来，对创伤和肿瘤等原因导致的软组织缺损的治疗都是整形科的常见问题。目前，主要采取的措施主要包括人工材料充填、自体脂肪移植等，但是，人工材料充填存在一定的异物反应风险，而自体脂肪移植的组织存活率低，脂肪吸收坏死率高，还容易引发并发症，限制了其在临床上的使用。

脂肪间充质干细胞是存在于脂肪组织中的，具有多项分化潜能的干细胞，具有来源丰富、取材方便的优点，因此被认为是组织再生和修复的理想种子细胞。基于脂肪间充质干细胞的成脂分化能力构建组织工程脂肪，能有效提高脂肪移植的效果，为软组织的缺损重建提供了新的途径，在组织工程和再生医学领域中具有良好的应用前景。但是，目前脂肪间充质干细胞成脂分化的效率较低，而且成脂诱导时间长，难以满足临床上对脂肪组织的大量需求，限制了其在临床上的应用。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种用于脂肪间充质干细胞成脂诱导的培养基以及诱导方法，提高脂肪间充质干细胞成脂分化的效率，缩短成脂诱导时间，提高其在临床应用的可行性。

一种用于脂肪间充质干细胞成脂诱导的培养基，包括第一培养基和第二培养基；

所述第一培养基包括含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基和以下终浓度的组分：地塞米松1-1.2μmol/L，胰岛素5-8μmol/L，吲哚美辛5-6nmol/L，虾青素4-6μmol/L,二苯乙烯苷1-2μmol/L；

所述第二培养基包括含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基和以下终浓度的组分：地塞米松1-1.2μmol/L，胰岛素4-6μmol/L，吲哚美辛5-6nmol/L，虾青素2-2.5μmol/L,二苯乙烯苷0.6-1.2μmol/L,黄芪甲苷4-8μmol/L，异鼠李素2-3μmol/L。

优选地，所述第一培养基包括含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基和以下终浓度的组分：地塞米松1.1μmol/L，胰岛素6μmol/L，吲哚美辛5nmol/L，虾青素4.5μmol/L,二苯乙烯苷1.5μmol/L。

优选地，所述第二培养基包括含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基和以下终浓度的组分：地塞米松1.1μmol/L，胰岛素5μmol/L，吲哚美辛5nmol/L，虾青素2.4μmol/L,二苯乙烯苷0.8μmol/L,黄芪甲苷5μmol/L，异鼠李素2.5μmol/L。

一种脂肪间充质干细胞的成脂诱导方法，将脂肪间充质干细胞先在权利要求所述的第一培养基中进行培养，再在所述的第二培养基中进行培养。

优选地，将脂肪间充质干细胞先在所述的第一培养基中培养5-7天，再在所述的第二培养基中继续进行培养。更优选地，将脂肪间充质干细胞先在所述的第一培养基中培养6天，再在所述的第二培养基中继续进行培养4天。

优选地，所述脂肪间充质干细胞为第3-6代的脂肪间充质干细胞。

优选地，所述脂肪间充质干细胞接种至第一培养基中的接种密度为(1-2)×10⁴个/cm²。

优选地，所述培养在37℃，5％体积的CO₂条件下进行。

优选地，脂肪间充质干细胞在所述的第一培养基中进行培养时，每隔36-48h更换新鲜培养基，在所述的第二培养基中进行培养时，每隔18-24h更换新鲜培养基。