[发明专利]一种血液中氟康唑药物浓度监测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种血液中氟康唑药物浓度监测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括校准品试剂、质控品试剂、处理液、萃取液、清洗液、洗脱液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述校准品试剂为含氟康唑冻干粉、稳定剂与塑型剂的动物血清，所述氟康唑冻干粉在动物血清中的浓度范围为0.5～15mg/L，浓度梯度为0.5～15mg/L；所述稳定剂的浓度为10～30g/L，所述塑型剂的浓度为10～30g/L；

所述质控品试剂为含氟康唑冻干粉、稳定剂与塑型剂的动物血清，所述氟康唑冻干粉在动物血清中的浓度范围为0.5～15mg/L，所述稳定剂的浓度为10～30g/L，所述塑型剂的浓度为10～30g/L；

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述稳定剂的浓度为15～25g/L，所述塑型剂的浓度为15～25g/L；

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述样本处理液为醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量为5％～15％，所述乙腈的含量为5％～15％。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述萃取液包括萃取液H1和萃取液H2；

所述萃取液H1为醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量为3％～10％，所述乙腈的含量为2％～8％。

所述萃取液H2为醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.05‰～0.15‰，所述甲醇的含量为30％～50％，所述乙腈的含量为40％～70％。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的清洗液为甲醇或乙腈或两种混合物的水溶液。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的洗脱液包括洗脱液A、洗脱液B和洗脱液C；

所述洗脱液A为醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.05‰～0.15‰，所述甲醇的含量为0％～15％，所述乙腈的含量为70％～90％；

所述洗脱液B醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量为0％～10％，所述乙腈的含量为5％～15％；所述洗脱液B的pH为3～5；

所述洗脱液C醋酸盐缓冲溶液、乙腈和甲醇中的一种或两种以上的混合物的水溶液，所述醋酸盐缓冲溶液中醋酸铵的含量为0.1‰～0.3‰，所述甲醇的含量为0％～10％，所述乙腈的含量为5％～15％；所述洗脱液B的pH为6～8。

8.根据权利要求4～7任意一项所述的试剂盒，其特征在于：所述的醋酸缓冲液包括醋酸、醋酸铵、氨水的一种或两种及以上的混合物。

9.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于：所述的稳定剂为牛血清白蛋白(BSA)；所述的塑型剂甘露醇和蔗糖一种或两种的混合物，所述甘露醇与蔗糖的混合物的比例为1：2～5。

10.一种权利要求1所述的试剂盒的检测方法，包括如下步骤：血液样品经离心后取上清液进样，通过在线固相萃取柱进行在线净化、富集、解吸及柱前后补偿联用，再通过阀切换方式将血液样品中目标分析物送入分析柱中进行分离，最后通过紫外检测器，或二极管阵列检测器，或质谱检测器等分析检测，采用标准曲线法进行计算，最终获得血液样品中药物浓度值；

计算公式如下：拟合线性回归方程：y＝ax+b，其中a为斜率，b为截距，y为实测峰面积，x为标示浓度，样本结果计算：将样本的氟康唑峰面积代入标准曲线方程，计算样本中的氟康唑浓度；

具体步骤如下：

(1)取待检测样品1～4mL，在离心速度为3000～5000rpm下离心10min，取上清液得血清或血浆；

(2)取上述血清或血浆，移取1.0ml加入样品瓶中，放入自动进样器中进样100ul进行液相色谱定量检测；

(3)根据上述公式计算出样本中的药物浓度。