[发明专利]一种三叶青药材的质量检测方法

权利要求书

1.一种三叶青药材的质量检测方法，其特征在于，采用紫外分光光度法，以三叶青中含有的黄酮碳苷类化合物为对照品，采用高浓度醇水系统提取，蒸干提取液后用水溶解，再依次用中极性有机溶剂和水饱和正丁醇萃取，蒸干正丁醇萃取液，用醇水体系溶解以得到总黄酮苷，然后用直接测定法在最大波长处进行三叶青药材总黄酮苷的含量测定。

2.根据权利要求1所述的一种三叶青药材的质量检测方法，其特征在于，具体检测步骤如下：

1)取三叶青块根干燥粉碎，过60目筛，取1g精密称定，加入25mL高浓度醇水系统回流提取10-60min，提取完成后，过滤，以原提取溶剂稀释至25mL，摇匀，作为提取液；

精密量取10mL提取液，蒸干，用10mL水复溶，用中极性有机溶剂萃取3次，每次10mL，弃去有机相；再用水饱和正丁醇萃取3次，每次10mL，弃去水相。蒸干正丁醇萃取液，用80％甲醇复溶至10mL容量瓶中，配成供试液；

2)对照品溶液的制备：精密称取荭草苷对照品0.0016g，用80％甲醇稀释成0.032mg/mL的溶液；

3)测定法：精密量取2mL供试液至5mL容量瓶中，用80％甲醇定容，以80％甲醇为空白参比溶剂；采用紫外分光光度法，测试在336nm波长处的吸光度，空白溶液无干扰；用标准曲线法计算含量。

3.根据权利要求2所述的一种三叶青药材的质量检测方法，其特征在于，更为具体检测步骤如下：

1)取三叶青块根干燥粉碎，过60目筛，取1g精密称定，加入25mL80％甲醇，回流提取30min，提取完成后，过滤，以原提取溶剂稀释至25mL，摇匀，作为提取液；

精密量取10mL提取液，蒸干，用10mL水复溶。用水饱和乙酸乙酯萃取3次，每次10mL，弃去有机相；再用水饱和正丁醇萃取3次，每次10mL，弃去水相，蒸干正丁醇萃取液，用80％甲醇复溶至10mL容量瓶中，配成供试液；

2)对照品溶液的制备：精密称取荭草苷对照品0.0016g，用50mL80％甲醇稀释成0.032mg/mL的溶液；精密量取荭草苷对照品溶液1、1.5、2、2.5、3、3.5mL，分别加入5mL容量瓶中，定容，即得对照品溶液，测定标准曲线；

3)测定法：精密量取2mL供试液至5mL容量瓶中，用80％甲醇定容，以80％甲醇为空白参比溶剂；采用紫外分光光度法，测试在336nm波长处的吸光度，空白溶液无干扰；用标准曲线法计算含量，以吸光度为纵坐标Y，荭草苷浓度为横坐标X进行线性回归，求得回归方程式为y＝37.277x-0.002，相关系数R²＝0.9985，浓度在0.0064mg/mL-0.0224mg/mL范围内线性关系良好。

4.根据权利要求1和2所述的一种三叶青药材的质量检测方法，其特征在于，所述三叶青中含有的黄酮碳苷类化合物对照品包括但不限于荭草苷、异荭草苷三叶青中含有的黄酮碳苷。

5.根据权利要求1和2所述的一种三叶青药材的质量检测方法，其特征在于，所述提取用高浓度醇水系统包括但不限于浓度为60％-95％的甲醇水溶液体系和乙醇水溶液体系；所述中极性有机溶剂包括但不限于三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯。