[发明专利]一种三叶青药材的质量检测方法

说明书

本发明公开了一种三叶青药材的质量检测方法，以紫外分光光度法测定药材中总黄酮苷含量，以三叶青中含有的黄酮碳苷类化合物为对照品，采用高浓度醇水系统提取，蒸干提取液后用水溶解，再依次用中极性有机溶剂和水饱和正丁醇萃取，蒸干萃取液用醇水体系溶解以得到总黄酮苷，再进行总黄酮苷的含量测定。该方法简便、易行、重复性好，能够确切反映三叶青药材中总黄酮苷的含量，进一步完善了三叶青药材的质量标准，弥补了三叶青质量评价中缺乏对以黄酮苷为代表的黄酮类特征成分的检测方法的不足，使三叶青药材的质量检测技术更科学、合理。采用本发明所述检测方法可有效控制三叶青药材的质量，从而确保其临床应用的安全性、稳定性和有效性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种三叶青药材的质量检测方法。

背景技术

三叶青是葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels etGilg)，别名金线吊葫芦、三叶扁藤、石老鼠、蛇附子等。全草均可入药，以地下块根和果实的药用效果最好，冬至至惊蛰期间采摘质量最好。三叶青在浙江、江西、福建、广西和四川等省份均有分布，其中以浙江产三叶青的品质最佳。三叶青被称为“植物抗生素”，药用和经济价值非常高，被列为珍稀保护植物。据《本草纲目》记载，三叶青性凉、无毒、味甘微苦，具清热解毒、活血祛风之功效。常用于治疗小儿高热惊厥、小儿风热、肺炎、肝炎等，外用治毒蛇咬伤、扁桃体炎、痈疮疔疖、蜂窝织炎、跌打损伤等。现代药理研究表明，三叶青药理作用广泛，具有抗肿瘤、抗炎、保肝和调节免疫等功能。

通过文献调研，三叶青的主要药理成分及其特征为：

(1)黄酮类化合物

黄酮及其苷类化合物是三叶青中含量最丰富的成分，是目前三叶青化学成分中研究最多的一类成分，且实验表明其具有明显药理作用。

目前已经确定结构的三叶青黄酮类化合物有二十余种，其中包括黄酮及其苷类化合物。许文等(许文,傅志勤,林婧,等.HPLC-MS/MS法同时测定三叶青中10种黄酮类成分[J].药学学报,2014,49(12):1711-1717.)建立超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法测定三叶青中4种成分(芦丁、异槲皮苷、山柰酚芸香糖苷、紫云英苷)的含量。林婧等(林婧,纪明妹,黄泽豪,等.三叶青的化学成分及其体外抗肿瘤活性研究[J].中国药学杂志,2015,50(8):658-663.)在三叶青全草中分离鉴定10个黄酮类化合物，其中芹菜素、荭草素和异荭草素等为首次从该植物中分离得到。福建中医药大学申请了三叶青地上部分总黄酮的提纯方法(201410648201.2)，但非黄酮苷；同时还申请了通过RRLC-Q-TOF-MS法快速定性鉴定或定量检测三叶青叶中主要黄酮成分的专利(201611139156.3)。

但目前尚未有报道检测三叶青黄酮苷类成分的总含量的方法。就检测方法而言，其中HPLC、HPLC-MS法检测单个或几个黄酮苷的方法已有报道，但较为繁琐。就黄酮类化合物而言，主要包括黄酮氧苷和黄酮碳苷，其中黄酮碳苷相对而言具有更好的结构特异性和稳定性，因此我们深入研究了黄酮碳苷类化合物的性质，建立一种紫外分光光度法测定总黄酮苷的方法，能够对三叶青进行总黄酮苷含量检测，研究三叶青的质量。

(2)酚酸类化合物

酚酸是一类分布广泛的芳香类次生代谢产物，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理活性。目前从三叶青中已经发现30余种酚酸类化合物，其中包括酚酸类化合物5-咖啡酰奎宁酸、3-咖啡酰奎宁酸、1-咖啡酰奎宁酸、5-对香豆酰奎宁酸、水杨酸、苯甲酸、绿原酸、原儿茶酸等，而且证明了在体外具有抗氧化活性。

(3)三萜及甾体类化合物