[发明专利]免疫调节能力增强的干细胞及其制备方法、组合物及用途有效
| 申请号： | 201910680636.8 | 申请日： | 2019-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN110564692B | 公开（公告）日： | 2022-07-15 |
| 发明（设计）人： | 王松灵;胡磊;徐骏疾;陈万军;吴婷婷;李艳 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学;汇富北斗（北京）科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京科石知识产权代理有限公司 11595 | 代理人： | 李艳霞 |
| 地址： | 100069 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 免疫调节 能力 增强 干细胞 及其 制备 方法 组合 用途 | ||
1.一种免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞，其特征在于，所述干细胞内Id3基因的表达量降低或ID3的活性降低，其中所述活性包括ID3与E2A的结合活性，所述干细胞的表面至少表达有Stro-1、CD146、CD90。
2.一种免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，其包括降低细胞内Id3基因的表达量或降低ID3蛋白的活性的步骤，其中所述活性包括ID3与E2A的结合活性。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：
(1)合成Id3基因的siRNA；
(2)将所述siRNA转入骨髓间充质干细胞；
(3)筛选出细胞内ID3蛋白的表达下降或不表达的细胞，即为免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，其中所述siRNA选自SEQ ID No:1-3中的至少之一。
5.一种免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：
(1)构建包含失活Id3基因载体；
(2)将所述基因载体导入同源胚胎干细胞中，使所述基因载体与胚胎干细胞的基因组相应部分发生同源重组，从而使所述基因载体整合到内源基因组中，得到同源重组胚胎干细胞；
(3)将所述同源重组胚胎干细胞注射入小鼠囊胚中，获得嵌和体小鼠；
(4)将嵌和体小鼠与野生型小鼠交配获得F1代杂合小鼠；
(5)使F1代杂合小鼠交配，从其中筛选得到纯合体；
(6)从所述纯合体小鼠的骨髓中分离得到免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞。
6.一种组合物，其包含根据权利要求1所述的免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞和药物学可接受载体。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述的组合物包括生理盐水，且所述免疫调节能力增强的骨髓间充质干细胞在所述生理盐水中的浓度为104至109个/ml。
8.试剂在制备用于通过下述方法增强机体免疫调节能力的药物中的用途，其特征在于，所述试剂包括权利要求1所述的骨髓间充质干细胞，或者权利要求6或7所述的组合物；
所述方法包括向有需要的受试者施用根据权利要求1所述的骨髓间充质干细胞或其后代的步骤；或者向有需要的受试者施用根据权利要求6或7所述的组合物的步骤。
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