[发明专利]免疫调节能力增强的干细胞及其制备方法、组合物及用途

说明书

本发明公开免疫调节能力增强的干细胞及其制备方法、含其的组合物及用途。本发明通过使干细胞内Id3基因的表达量降低或ID3的活性降低来增强干细胞的免疫调节能力。本发明的免疫调节能力增强的干细胞可用于治疗自身免疫相关的疾病或病况。

技术领域

本发明大致涉及生物医药领域，具体涉及一种免疫调节能力的干细胞及其制备方法、含其组合物及增强和检测干细胞的免疫调节能力的方法。

背景技术

自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AD)是一种免疫应答紊乱，机体免疫系统对自身抗原攻击，造成组织器官损伤和功能障碍的疾病，具有较高的致残率和致死率。大多数的AD为多发性硬化症、全身性硬化症、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、幼年特发性关节炎和免疫细胞减少症等。自身免疫疾病的发生是一个及其复杂的调控网络，除了淋巴细胞，如T细胞、B细胞、树突状细胞以及NK细胞参与自身免疫疾病的发病过程之外，间充质干细胞(MSCs)的免疫调节功能的紊乱在自身免疫疾病发病中也具有重要的作用。目前靶向抑制T细胞、B细胞药物并不能有效治疗自身免疫疾病，而自体或异体的MSCs移植能有效的缓解多种自身免疫疾病的症状，如糖尿病，类风湿性关节炎，干燥综合征等。因此如何调控内源性MSCs的免疫调节功能，对自身免疫疾病治疗具有关键作用。

MSCs是一类可从多类成体组织中分离的能向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞等分化的成体干细胞。随着对MSCs认识的不断深入，还发现MSCs具有低/无免疫原性和免疫调节功能，对固有免疫系统和获得性免疫系统的多种免疫细胞都有免疫抑制的效果。MSCs既能通过细胞与细胞间的直接接触，也可通过旁分泌产生细胞因子对靶细胞进行免疫调控。MSCs通过细胞与细胞直接作用的方式可作用于多种免疫细胞，如自然杀伤细胞、T细胞和B细胞等。MSCs通过旁分泌的方式产生细胞因子、趋化因子和生长因子等大量生物活性物质，参与对免疫细胞的调控，包括吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、白细胞介素(IL-6,IL-10)、转化生长因子(transforming growth factor-β，TGF-β)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)、HLA-G和一氧化氮(nitricoxide,NO)等，共同形成了一个复杂的网络调控体系。MSCs可诱导外周免疫耐受并且可迁移到受损组织，抑制促炎症因子表达，促进受损细胞的存活。MSCs免疫调节功能受低氧、炎症、衰老等多种因素的影响，越来越多的课题组都开始意识到寻找构建一种提高MSCs免疫调节功能方法的重要性，使其产生更加明显和持久的治疗作用。

发明内容

为解决至少部分上述技术问题，本发明进行了深入研究，并发现通过使干细胞内Id3基因的表达量降低或ID3的活性降低可以增强干细胞的免疫调节能力。至少部分地基于该发现完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本发明的第一方面，提供一种免疫调节能力增强的干细胞，其细胞内Id3基因的表达量降低或ID3的活性降低，其中所述活性包括ID3与E2A的结合活性。

在某些实施方案中，免疫调节能力增强的干细胞的细胞表面至少表达有Stro-1、CD146、CD90。

在某些实施方案中，所述干细胞选自间充质干细胞和造血干细胞中的至少之一。优选骨髓间充质干细胞。

本发明的第二方面，提供一种免疫调节能力增强的干细胞的制备方法，其包括降低细胞内Id3基因的表达量或降低ID3蛋白的活性，其中所述活性包括ID3与E2A的结合活性。

在某些实施方案中，本发明的制备方法包括以下步骤：

(1)合成Id3基因的siRNA；

(2)将所述siRNA转入干细胞，优选地，其中所述siRNA选自SEQ ID No:1-3中的至少之一；