[发明专利]全人源抗金黄色葡萄球菌α-溶血素重组抗体有效
| 申请号： | 201910681843.5 | 申请日： | 2019-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN110437334B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 袁青;年四季;李春;于红;叶迎春 | 申请（专利权）人： | 西南医科大学 |
| 主分类号： | C07K16/12 | 分类号： | C07K16/12;C07K16/46;C12N15/70 |
| 代理公司： | 重庆双马智翔专利代理事务所(普通合伙) 50241 | 代理人： | 顾晓玲 |
| 地址： | 646000 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 全人 金黄色 葡萄球菌 溶血 重组 抗体 | ||
1.一种抗金黄色葡萄球菌α-溶血素单链抗体，其特征在于：所述单链抗体为scFv2或scFv46，所述scFv2的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No:4所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID No:5所示；所述scFv46的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No:6所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID No:7所示。
2.如权利要求1所述的抗金黄色葡萄球菌α-溶血素单链抗体，其特征在于：所述scFv2或scFv46的重链可变区与轻链可变区由连接肽linker连接，所述连接肽linker的氨基酸序列为(Gly4Ser)3。
3.一种抗金黄色葡萄球菌α-溶血素重组抗体，其特征在于：所述重组抗体为scFv2-Fc或scFv46-Fc，所述scFv2-Fc的氨基酸序列包含权利要求2所述的scFv2和人抗体恒定区Fc段氨基酸序列；所述scFv46-Fc的氨基酸序列包含权利要求2所述的scFv46和人抗体恒定区Fc段氨基酸序列；所述人抗体恒定区Fc段氨基酸序列如SEQ ID No:26所示。
4.一种全人源抗金黄色葡萄球菌α-溶血素重组抗体的真核表达载体，其特征在于：所述真核表达载体由将权利要求2所述的抗金黄色葡萄球菌α-溶血素单链抗体的序列插入通用表达载体sp-Fc/pcDNA3.1中得到，得到的真核表达载体为sp-scFv2-Fc/pcDNA3.1或sp-scFv46-Fc/pcDNA3.1，编码所述通用表达载体sp-Fc/pcDNA3.1的核酸序列如SEQ ID No:13所示。
5.一种全人源抗金黄色葡萄球菌α-溶血素重组抗体的重组表达载体，其特征在于：所述重组载体为sp-scFv2-Fc/pMH3或sp-scFv46-Fc/pMH3，是通过以下方法构建得到：以权利要求4所述的sp-scFv2-Fc/pcDNA3.1或sp-scFv46-Fc/pcDNA3.1为模板，采用sp-scFv-Fc片段扩增引物扩增sp-scFv2-Fc片段或sp-scFv46-Fc片段，将得到的扩增片段插入pMH3载体即得。
6.如权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于：所述sp-scFv-Fc片段扩增引物为sp-EcoRI-F、Fc-NotI-R，sp-EcoRI-F的序列如SEQ ID No:22所示，Fc-NotI-R的序列如SEQID No:23所示。
7.如权利要求5或6所述的重组表达载体，其特征在于：所述扩增片段插入pMH3载体的方法为先将以sp-scFv2-Fc/pcDNA3.1或sp-scFv46-Fc/pcDNA3.1模板扩增得到的sp-scFv2-Fc或sp-scFv46-Fc片段和pMH3载体采用
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