[发明专利]一种短肽类发酵产物及其制备方法和应用在审
申请号: | 201910683957.3 | 申请日: | 2019-07-26 |
公开(公告)号: | CN110358800A | 公开(公告)日: | 2019-10-22 |
发明(设计)人: | 朱虎;王颖璐;常爱平;李丽;鱼晓丹;何侨妹;戴晓芸 | 申请(专利权)人: | 福建师范大学 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C12N1/14;A61K38/02;A61P31/04;C12R1/82 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人: | 李蕊 |
地址: | 350007 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 发酵产物 制备方法和应用 震荡培养 发酵液 短肽 铜绿假单胞菌 乙酸乙酯萃取 液体培养基 种子液接种 保藏 产黄青霉 代谢产物 海洋真菌 紫色杆菌 培养基 菌丝球 有机相 种子液 活化 制备 接种 破碎 浓缩 感染 治疗 | ||
1.一种短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将保藏编号为CCTCC NO:M 2018731的产黄青霉DXY-1活化后,接种至培养基中,于25~30℃、120~150r/min震荡培养65~80h,得种子液;
(2)将种子液接种至液体培养基中,于25~30℃、120~150r/min震荡培养7~10天后,收集发酵液;其中,所述种子液的接种量为液体培养基体积的5~10%;
(3)破碎发酵液中的菌丝球,再加入乙酸乙酯萃取3~5次,收集并浓缩有机相即可;其中,所述发酵液与乙酸乙酯的体积比为1:1~3。
2.根据权利要求1所述的短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述培养基为PDA培养基,其具体组成如下:2%葡萄糖、2%琼脂、20%马铃薯,以及0.01%氯霉素,溶于陈海水,并在115℃灭菌30min;所述培养条件为:28℃、150r/min震荡培养72h。
3.根据权利要求1所述的短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述种子液的接种量为液体培养基体积的5%;所述液体培养基的具体组成如下:4%葡萄糖、1%蛋白胨、0.5%NaCl,溶于陈海水,并在115℃灭菌30min。
4.根据权利要求1所述的短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述培养条件为28℃、150r/min震荡培养7天。
5.根据权利要求1所述的短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,还包括步骤(4):
用甲醇溶解步骤(3)所得产物后,分别用二氯甲烷、二氯甲烷-甲醇,以及甲醇作为洗脱液进行硅胶柱层析,洗脱体积为一个柱体积。
6.根据权利要求5所述的短肽类发酵产物的制备方法,其特征在于,所述二氯甲烷-甲醇作为洗脱液进行洗脱时,以20:1、10:1、5:1、2:1和1:1的比例进行梯度洗脱。
7.权利要求1~6任一项所述方法提取得到的发酵产物。
8.权利要求7所述的发酵产物在制备淬灭细菌群体感应系统活性的抑制剂中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述细菌为紫色杆菌或铜绿假单胞菌。
10.一种治疗由细菌群体感应系统调控引起的感染的药物,其特征在于,包括权利要求7所述的发酵产物,以及该发酵产物在药学上可接受的辅助成分。
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