[发明专利]一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的交配型的方法及引物

说明书

一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的交配型的方法及引物，提取斑玉蕈白色单核菌株的基因组DNA，然后以引物HM1F/1R、HM2F/2R和HM3F/3R进行PCR扩增，如果不能用特异性引物扩增出条带的被认为是A_XB_X交配型菌株，如果能用特异性引物扩增出条带的被认为是AyBy交配型菌株。本发明的方法用于鉴定斑玉蕈白色菌株单核体菌株的交配型，具有耗时短，操作简便，精准度高，成本低的优点。

技术领域

本发明属于食用菌分子鉴定技术领域，具体涉及一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的交配型的方法及引物。

背景技术

斑玉蕈（Hypsizygusmarmoreus）是北温带一种珍稀名贵的大型木腐生食用真菌，又名：真姬菇、假松茸、斑口蘑、珍珠菇、蟹味菇、鸿喜菇等。斑玉蕈在分类地位上隶属于担子菌门(Basidiomycota)，层菌纲(Hymenomycetes)，伞菌目(Agaricales)，白蘑科(Tricholomataceae)，玉蕈属(Hypsizygus)。斑玉蕈作为食药兼用真菌，富含蛋白质、不饱和脂肪酸、氨基酸、粗纤维、糖类、维生素等；同时也存在多种活性物质，例如：核糖体抑制蛋白、胶原质结合蛋白、多糖和血管紧张素转换酶抑制剂等。斑玉蕈作为近年来工厂化生产技术最为成熟的食用菌品种之一，深受各国人民的喜爱。

随着目前国内斑玉蕈工厂化生产的不断发展和壮大，工业化的机械设备和先进的技术工艺在其中起到主要作用，但是，由于我国的斑玉蕈菌种资源研发比较薄弱，国内部分规模较大的企业长期以来依赖于国外（日本、韩国）引进菌种。而我国自主研发的菌种数量还很有限，至今没有完全适合国内生产的品种。

而通常的育种过程主要将不同基因型和生态型的单核体亲本进行杂交配对，然后对配对后具有锁状联合的双核体杂交子进行结实性和生产性验证，由于单核体的基因类型难以确定，以及杂交后锁状联合观察的复杂性和效率较低的缘故，使得斑玉蕈白色杂交育种繁琐耗时费力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的交配型的方法及引物。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的引物，其特征在于：包括3组引物对，第一组引物对的核苷酸序列如下：

HM1F: 5’- ACCTCTACTTCATCCTTGC-3’；

HM1R: 5’- TCTTGGGCGTCCGTTT-3’；

第二组引物对的核苷酸序列如下：

HM2F: 5’-CGTCCCAGATATTCAACTC-3’；

HM2R: 5’-GAAACCTCCAACGCACT-3’；

第三组引物对的核苷酸序列如下：

HM3F: 5’-CTGGCGTTACCTTCCC-3’；

HM3R: 5’-GTGGTTGTGGCGTGAT-3’。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种鉴定斑玉蕈白色菌株单核体的方法，包括3组引物对，第一组引物对的核苷酸序列如下：

HM1F: 5’- ACCTCTACTTCATCCTTGC-3’；

HM1R: 5’- TCTTGGGCGTCCGTTT-3’；

第二组引物对的核苷酸序列如下：

HM2F: 5’-CGTCCCAGATATTCAACTC-3’；

HM2R: 5’-GAAACCTCCAACGCACT-3’；