[发明专利]基于微生物转化续随子二萜烷型衍生物的方法及其制药用途

权利要求书

1.基于微生物转化续随子二萜烷型衍生物的方法，其特征在于：用多型孢毛霉Mucor polymorphosporus分别对千金子甾醇(euphorbiasteroid)和环氧续随子醇(epoxylathyrol)进行微生物转化；使用雅致小克银汉霉Cunninghamella elegans和伞枝犁头霉Absidia corymbifera对千金子甾醇(Euphorbiasteroid)进行了微生物转化，获得下式的续随子二萜烷型化合物：

其中，

化合物1 续随子醇：R₁=R₂=R₃=R₄=H

化合物2 大戟因子L3：R₁=Bz, R₂=R₄=Ac, R₃=H

化合物3 8β-环丙甲酰氧基大戟因子L3：R₁=Bz, R₂=R₄=Ac, R₃=

所述方法包括步骤：

（1）将生长在琼脂培养基上的多型孢毛霉Mucor polymorphosporus、雅致小克银汉霉Cunninghamella elegans和伞枝犁头霉Absidia corymbifera三种菌丝分别划线接种于马铃薯固体培养基上，在恒温培养箱中培养，得试管种；

（2）将试管种中的菌丝接种到250 mL的三角瓶中，每瓶含有PDA培养基，培养后获得种子液；

（3）将种子液接入新鲜马铃薯培养基，培养后，加入转化底物千金子甾醇或环氧续随子醇的乙醇溶液，转化培养；

（4）将发酵液用布氏漏斗减压过滤，获得发酵滤液和菌体，滤液用乙酸乙酯萃取，菌体剪碎，混悬于适量乙酸乙酯中，超声振荡提取后过滤，合并乙酸乙酯层，减压蒸干，发酵产物用半制备HPLC法分离得到发酵产物续随子醇(1)、大戟因子L3(2)和8β-环丙甲酰氧基大戟因子L3(3)。

2.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述的三种菌丝分别划线接种于马铃薯固体培养基上，在20-28 °C的恒温培养箱中培养3-7天，得试管种。

3. 按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，所述的三角瓶中，含有50mL的PDA培养基，培养温度为28 °C，转速为120 rpm，培养时间为3天。

4. 按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，将种子液按2%体积比接入新鲜马铃薯培养基，28 °C，120 rpm条件下培养24-72小时后，加入转化底物千金子甾醇或环氧续随子醇的乙醇溶液, 在28 °C、120 rpm的条件下转化培养7天。

5. 按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中，所述的滤液按1:1.5体积比用乙酸乙酯萃取3次，超声振荡提取10 min后过滤。

6.一种药物组合物，其中含有权利要求1所述的方法制得的化合物或其药学上可接受的溶剂化物及药学上可接受的载体。

7.权利要求6所述的药物组合物在用于制备抗肿瘤多药耐药的药物中的用途。