[发明专利]过表达木糖转运蛋白基因提高1,2,4-丁三醇产量的方法及应用

权利要求书

1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，在宿主细胞大肠杆菌中转入带有木糖转运蛋白基因xylE或araE的重组质粒，所述xylE编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述araE编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述宿主细胞为E. coli KXW3009，所述重组质粒的出发质粒为pCDFDuet-ara；所述pCDFDuet-ara是将质粒pCDFDuet-1与阿拉伯糖启动子araBAD分别用限制性内切酶XbaI和EcoRI双酶切，随后将纯化后的阿拉伯糖启动子基因与pCDFDuet-1连接构建而成。

2.如权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述xylE的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

3.如权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述araE的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示。

4.一种生产1,2,4-丁三醇的方法，其特征在于，应用权利要求1-3任一所述的重组大肠杆菌进行发酵。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵条件为：（1）挑取转化成功的重组大肠杆菌单菌落接种到种子培养基摇瓶中，35-38℃，150-180 rpm摇床中培养过夜，制备种子液；

（2）以1-5%的接种量，接种到发酵培养基，35-38℃，200-220 rpm摇床中培养40-60 h。

6.权利要求1-3任一所述重组大肠杆菌的构建方法，将xylE或araE基因与pCDFDuet-ara连接，将得到的重组质粒pCDFDuet-ara-xylE、pCDFDuet-ara-araE分别电击转化E. coli KXW3009，获得转化成功的重组大肠杆菌E.coli Z1、E.coli Z3。

7.权利要求1-3任一所述的重组大肠杆菌在医药或化工领域中制备1,2,4-丁三醇的应用。