[发明专利]一种底层血小板因子贴及sPL血小板因子凝胶贴膜的制备方法

权利要求书

1.一种底层血小板因子贴，其特征在于底层血小板因子贴包含底层衬膜(1)和上层盖膜(2)，上层盖膜(2)覆盖在底层衬膜(1)上；所述底层衬膜(1)中间区域向下凹陷形成血小板因子承载区(4)，血小板因子承载区上设置导流凸楞；所述上层盖膜(2)上设有进液口(3)，进液口(3)上设置密封盖(5)；其中进液口(3)位于血小板因子承载区中心的正上方。

2.根据权利要求1所述的一种底层血小板因子贴，其特征在于进液口(3)与无菌螺纹口压力注射器螺纹连接。

3.根据权利要求1所述的一种底层血小板因子贴，其特征在于血小板因子承载区(4)的深度为3mm。

4.根据权利要求1所述的一种底层血小板因子贴，其特征在于血小板因子承载区(4)为方形或圆形。

5.利用权利要求1所述的底层血小板因子贴制备sPL血小板因子凝胶贴膜的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、配置激活剂：用浓度为0.05～5mg/mL的葡萄糖酸钙溶液溶解凝血酶冻干粉，使凝血酶浓度成为500-800IU/mL，得到激活剂；

二、将血小板因子承载区(4)底部均匀喷涂质量浓度为0.005g/mL的I型胶原蛋白水溶液，然后在无菌环境中挥发至含水量为10％的凝胶状，其中每30cm²血小板因子承载区(4)喷涂1mL的I型胶原蛋白水溶液；

三、在无菌、温度2-4℃条件下，将激活剂均匀喷涂在已经涂有胶原蛋白的血小板因子承载区(4)上，然后将底层衬膜(1)经-80℃预冷2h后，放入无菌冻干机中冻干4h；

四、将上层盖膜覆盖在步骤三处理后的底层衬膜(1)上，存放备用；

五、制备sPL血小板因子制剂：a、采集10-20份抗凝脐带血或抗凝健康人外周血，混合均匀，其中每份抗凝血样体积为50-100ml，混合均匀后分装于离心管中，然后在20℃、转速200g-300g条件下离心10min，去除下层红细胞；然后将离心管内剩余血液混合均匀，再在20℃、1000g-2000g条件下离心15min；然后将上层血浆转移至新的离心管中留存，底层的血小板血浆颠倒混匀、计数，利用留存的上层血浆，将血小板浓度调整至1100*10⁹～1400*10⁹个/L；b、将步骤a的血小板血浆依次进行冰浴超声10min、37℃水浴2h；冰浴超声10min、37℃水浴2h；液氮浴2h；37℃水浴1min的操作，0.22μm滤器过滤，获得sPL血小板因子制剂，调整sPL血小板因子制剂中PDGF-AB的浓度至130-140ng/mL，然后吸入无菌螺纹口压力注射器内，随时备用；

六、打开进液口的密封盖(5)，将压力注射器与进液口(3)连接，然后将无菌螺纹口压力注射器内的sPL血小板因子制剂以1.5公斤/平方厘米的压力注入血小板因子承载区(4)，然后盖上密封盖(5)，待sPL血小板因子形成凝胶状后即得到sPL血小板因子凝胶贴膜；其中激活剂、I型胶原蛋白水溶液和注入的sPL血小板因子制剂的体积比为3:1:6。

6.根据权利要求5所述的一种sPL血小板因子凝胶贴膜的制备方法，其特征在于步骤三中无菌冻干机设置冷井温度为-60℃，真空度为0.1mbar。

7.根据权利要求5所述的一种sPL血小板因子凝胶贴膜的制备方法，其特征在于底层衬膜(1)为聚氨酯材料或聚丙乙烯材料。

8.根据权利要求5所述的一种sPL血小板因子凝胶贴膜的制备方法，其特征在于上层盖膜(2)为高密度聚乙烯或医用离型纸。

9.根据权利要求5所述的一种sPL血小板因子凝胶贴膜的制备方法，其特征在于sPL血小板因子制剂中PDGF-AB的浓度若低于130ng/mL，则在1100*10⁹～1400*10⁹个/L范围内调高步骤a中血小板浓度；若sPL血小板因子制剂中PDGF-AB的浓度若高于140ng/mL，则采用步骤a留存的上层血浆稀释。