[发明专利]一套用于构建桃DNA指纹图谱的SSR引物、应用及构建方法

权利要求书

1.一套用于构建桃DNA指纹图谱的SSR引物，其特征在于，由10对引物组成：

引物SSR73由如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物组成；

引物SSR93由如SEQ ID NO.3所示的上游引物和如SEQ ID NO.4所示的下游引物组成；

引物SSR96由如SEQ ID NO.5所示的上游引物和如SEQ ID NO.6所示的下游引物组成；

引物SSR107由如SEQ ID NO.7所示的上游引物和如SEQ ID NO.8所示的下游引物组成；

引物SSR125由如SEQ ID NO.9所示的上游引物和如SEQ ID NO.10所示的下游引物组成；

引物SSR152由如SEQ ID NO.11所示的上游引物和如SEQ ID NO.12所示的下游引物组成；

引物SSR169由如SEQ ID NO.13所示的上游引物和如SEQ ID NO.14所示的下游引物组成；

引物SSR179由如SEQ ID NO.15所示的上游引物和如SEQ ID NO.16所示的下游引物组成；

引物SSR181由如SEQ ID NO.17所示的上游引物和如SEQ ID NO.18所示的下游引物组成；

引物SSR184由如SEQ ID NO.19所示的上游引物和如SEQ ID NO.20所示的下游引物组成。

2.一种如权利要求1所述的SSR引物在构建桃指纹图谱中的应用。

3.一种如权利要求1所述的SSR引物在桃品种鉴定方面的应用。

4.一种利用权利要求1所述的SSR引物构建桃DNA指纹图谱的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）DNA提取：采用常规CTAB法提取样品DNA；

（2）PCR 扩增：以待测桃的基因组DNA为模板，用SSR引物对进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；

（3）3730XL DNA基因分析仪检测；

（4）基因分型：样品的每个SSR位点的等位变异采用扩增片段大小的形式表示。

5.根据权利要求4所述的利用SSR引物构建桃DNA指纹图谱的方法，其特征在于，PCR扩增的反应体系为：10×PCR缓冲液1 µL、dNTP混合物0.8 µL、上下游引物的混合物0.6 µL、20-30 ng/µL DNA样品1 µL、5 U/µL Taq DNA聚合酶0.1 µL、超纯水6.5 µL。

6.根据权利要求4所述的利用SSR引物构建桃DNA指纹图谱的方法，其特征在于，PCR扩增的反应程序为：95 ℃预变性5 min；95 ℃变性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共35个循环；4 ℃保存备用。