[发明专利]一种分步提取富硒堇叶碎米荠中蛋白质和多糖的方法

说明书

本发明公开了一种分步提取富硒堇叶碎米荠中蛋白质和多糖的方法，包括以下步骤：堇叶碎米荠的预处理、超声辅助提取、离心、高压脉冲电场二次提取、除蛋白、醇沉等。两步法制备得到的蛋白质和多糖提取物得率较高且富含有机硒，可作为富硒食品原料或营养强化剂综合开发利用。同时，本方法通过超声技术提取富硒堇叶碎米荠中的蛋白质，滤渣加水后再利用高压脉冲电场制备硒多糖，提取过程能耗低，避免了有机溶剂的使用，可在大多数实验室重复实现，具有工业化生产的潜力。

技术领域

本发明属于食品加工领域，更具体地，涉及一种分步提取富硒堇叶碎米荠中蛋白质和多糖的方法。

背景技术

硒是人体和动物体内必需的微量元素，参与辅酶的合成，具有抗氧化、抗衰老、抗癌、拮抗重金属毒性等作用，缺乏硒时会引起克山病、大骨节病等40多种疾病。目前世界上有40多个国家缺硒。研究表明，有机硒主要存在硒蛋白、硒多糖中，提取富集含硒的活性成分对开发富硒功能食品具有非常重要的理论和实际意义。

堇叶碎米荠是一种富硒能力极强的十字花科碎米荠植物，其蛋白质含量约为18％，多糖含量约为6％。碎米荠种植面积广，适应性强，分布密度大，资源充足，具有很高的药用和食用价值，能将无机硒转化为有机硒。

实验室数据显示，富硒土壤(硒浓度大于0.4mg/kg)中生长的碎米荠总硒含量为1365mg/kg，而通过强化培养(条件未公开)得到的碎米荠叶中硒含量可达3000mg/kg，根部硒含量甚至可高达8000mg/kg，具有“富硒之王”的称号。大量研究表明硒具有防癌、抗癌、拮抗重金属、清除自由基、抗氧化、保护细胞膜、增强机体免疫性。因此，基于堇叶碎米荠的超富硒能力及经济适用性，其极具潜力成为工业化生产硒蛋白和硒多糖的原材料。倘若依托堇叶碎米荠提取分离含硒蛋白和硒多糖，并开发一系列富硒食品或营养强化剂，不仅可充分发挥对硒资源的综合利用，还将有利于开展有机硒生物活性相关的理论研究。

传统对天然植物的蛋白质提取方法有：溶剂提取法、酶解法等。溶剂提取采用大量的有机试剂，提取时间一般6-12小时，不仅会对环境造成污染，而且费时且提取得率低。酶解法其提取时间一般4-5小时，酶的价格较为昂贵且酶解环境范围比较窄。超声辅助提取也是一种常用的植物有效成分提取的方法，超声产生的高压和温度梯度，利用其空化效应、机械效应、热效应破坏细胞结构，可加快细胞内物质的释放、扩散。近几年，高压脉冲电场是一种高效提取植物活性成分提取方法，电场通过改变细胞膜内外电介质的排列顺序，而引起细胞膜出现不可逆的小孔，加快物质的流出。但高压脉冲电场在植物活性成分的提取还未得以推广和利用，到目前为止还没有出现对原料进行超声提取蛋白质后再利用高压脉冲电场提取多糖的报道。

发明内容

本方法目的在于解决上述问题，提供一种分步提取富硒堇叶碎米荠中蛋白质和多糖的方法，通过超声辅助提取获得堇叶碎米荠中大部分蛋白质，再利用高压脉冲电场制备多糖提取物。

为了实现上述目的，本发明提供一种分步提取富硒堇叶碎米荠中蛋白质和多糖的方法，该方法包括：

1)将富硒堇叶碎米荠烘干、粉粹；

2)将粉粹后的富硒堇叶碎米荠以水溶解得到溶液，调节溶液的pH为9-10，进行超声提取，得到第一提取液；

3)将第一提取液进行离心，得到上清液和第一沉淀，所述上清液即为硒蛋白质提取物；

4)将步骤3)得到的第一沉淀以水溶解，然后经脉冲电场处理，得到第二提取液；

5)将第二提取液除蛋白、醇沉，然后进行离心，得到第二沉淀；

6)将第二沉淀以水复溶，得到硒多糖提取物。

本发明中，所述富硒堇叶碎米荠是指在富硒土壤中生长的堇叶碎米荠，所述富硒土壤是指硒浓度大于0.4mg/kg的土壤。