[发明专利]一种内质网应激细胞模型的建立方法在审
| 申请号： | 201910699795.2 | 申请日： | 2019-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN110317776A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 何毅怀;陈欢;王娟 | 申请（专利权）人： | 遵义医学院附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 瞿晓晶 |
| 地址： | 563000 *** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胡萝卜素 内质网应激 细胞模型 细胞 肝再生 生长对数期 表达差异 肝脏疾病 实验基础 再生信号 低表达 干预 诱导 受阻 检测 发现 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种内质网应激细胞模型的建立方法，包括以下步骤：
将处于生长对数期的LO2细胞给予毒胡萝卜素干预，在所述干预48h后，得内质网应激细胞模型；所述LO2细胞与毒胡萝卜素的比值为106个细胞：5mL所述毒胡萝卜素；所述毒胡萝卜素的浓度为0.5μm。
2.根据权利要求1所述建立方法，其特征在于，所述干预的方法，包括：(1)1mmol/L的TG母液用含10％胎牛血清培养基在室温条件下稀释至2000倍，得TG工作液；
(2)用PBS缓冲液清洗所述LO2细胞两次，吸弃PBS后与所述TG工作液混合，将与TG工作液混合后的LO2细胞孵育48h。
3.根据权利要求2所述建立方法，其特征在于，步骤(1)所述TG工作液的浓度为0.5μm。
4.根据权利要求1所述建立方法，其特征在于，得所述内质网应激细胞模型后，还包括检测GRP78和肝细胞再生信号蛋白的表达量，和检测细胞活力。
5.根据权利要求4所述建立方法，其特征在于，所述肝细胞再生信号蛋白包括TNFR1、NF-κB、gp130、c-Met和cyclin D1。
6.根据权利要求4所述建立方法，其特征在于，所述检测细胞活力的方法为MTS法。
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