[发明专利]一种毛囊干细胞的移植方法

说明书

本发明公开了一种毛囊干细胞的移植方法，所述一种毛囊干细胞的移植方法包括以下步骤：(1)首先在无菌室中取人体头皮组织，随后将头皮组织中加入中性蛋白酶进行消化清洗，清洗后按照毛囊生长方向拔出完整的毛囊；(2)制备第一干细胞培养基。本发明采用全新配方的第一干细胞培养基可以是毛囊干细胞可以快速的增长，可以为其提供大量的营养物质，本发明通过设置第二干细胞培养基可以快速扩增干细胞，可以使其相对于常规干细胞提高一倍以上，而且其适应性较强，这种移植方法可以使被移植的毛囊干细胞成活率达到95％以上，而且移植方式合理高效，便于推广。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种毛囊干细胞的移植方法。

背景技术

毛囊干细胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一种。毛囊干细胞属于成体干细胞，具有，在体内处于静止状态，在体内培养活内环境作用下表现出惊人的增殖能力。研究发现，毛囊干细胞具有多向分化潜能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，参与皮肤创伤愈合的过程。

在毛囊干细胞移植过程之前需要将其进行预先培养，而在培养的过程中因为培养基的营养成分不同，而有些一些培养基中营养成分中会出现大量的胶原酶或胰蛋白酶会影响到毛囊干细胞的正常生长，造成培养的毛囊干细胞活性较低，即使一直到受体时也会出现大量坏死情况的出现，严重影响毛囊干细胞移植的存活量，为此，我们提出一种毛囊干细胞的移植方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种毛囊干细胞的移植方法，以解决背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种毛囊干细胞的移植方法，所述一种毛囊干细胞的移植方法包括以下步骤：

(1)首先在无菌室中取人体头皮组织，随后将头皮组织中加入中性蛋白酶进行消化清洗，清洗后按照毛囊生长方向拔出完整的毛囊；

(2)制备第一干细胞培养基，所述第一干细胞培养基添加的营养成分包括谷氨酰胺、氢离子缓冲剂、氢化可的松、牛胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、青霉素、链霉素和生理盐水，所述第一干细胞培养基添加的营养成分的重量份数为谷氨酰胺1.8-2.2mmol/L,氢离子缓冲剂1.9-2.1mmol/L,氢化可的松9-11ng/mL,牛胰岛素9.5-10.5ug/mL,转铁蛋白9-10.5ug/mL,亚硒酸钠9-11ng/mL,青霉素98-102U/mL,链霉素95-105ug/mL；

(3)将步骤(1)得到的完整毛囊放入步骤(2)得到的第一干细胞培养基中进行培养，所述第一干细胞培养基培养温度为36-38℃；

(4)制备第二干细胞培养基，所述第二干细胞培养基添加的营养成分包括血清替代物、维生素C、干细胞生长因子、谷氨酰胺、血小板源生长因子和生理盐水，所述第二干细胞培养基添加的营养成分的重量份数为血清替代物9-12ug/mL、维生素C40-60ug/mL、干细胞生长因子6-8ng/mL、谷氨酰胺3-5mmol/mL、血小板源生长因子11-13ng/mL，

(5)将步骤(3)培养的完整毛囊干细胞汇合度长至50-60％时将其转移至第二干细胞培养基中，在培养过程中第一干细胞培养基每24-36h更换一次；

(6)将步骤(5)在第二干细胞培养基培养的完整毛囊干细胞汇合度长至80-90％时进行传代，在培养过程中第二干细胞培养基每36-48h更换一次，所述第二培养基培养温度为36-38℃；

(7)根据待移植的位置，将步骤(3)培养完成的毛囊干细胞注射至待移植的部位，在注射过程中采用分散注射的方式进行注射，每次注射点应在120-160个，注射过程中每间隔20-30天注射一次。

进一步的，所述毛囊干细胞移植过程中所有步骤均在无菌环境中进行。