[发明专利]一种提高γ-氨基丁酸产量的方法有效
申请号: | 201910703126.8 | 申请日: | 2019-07-31 |
公开(公告)号: | CN110373438B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 王小元;王建莉;马文渐;方宇;李烨 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N15/70;A23K10/12;A23L29/00;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 彭素琴 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 氨基 丁酸 产量 方法 | ||
1.一种高效合成γ-氨基丁酸(GABA)的方法,其特征在于,敲除大肠杆菌基因组上ADP-L-甘油-D-甘露-庚糖-6-差向异构酶RfaD基因得到重组菌后,利用重组菌进行发酵生产。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌W3110或大肠杆菌DH5α。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述ADP-L-甘油-D-甘露-庚糖-6-差向异构酶RfaD的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.根据权利要求1所述的方法,所述发酵生产是将所述的重组菌接种到发酵培养基中,以葡萄糖为底物,进行发酵生产。
5.根据权利要求4所述的方法,所述发酵具体是:将所述重组菌的种子液转接至发酵培养基,并加入卡那霉素和诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)后进行发酵。
6.根据权利要求5所述的方法,所述种子液是将所述重组菌接种至LB培养基中,并添加卡那霉素,37℃培养至对数中期得到。
7.根据权利要求4所述的方法,所述发酵培养基的组成为:15-25g/L葡萄糖,15-20g/LNa2HPO4·12H2O,1-5g/L KH2PO4,0.2-0.8g/L NaCl,添加1-3mM MgSO4,0.1-0.3mM CaCl2,0-10mg/mL维生素B1。
8.根据权利要求7所述的方法,所述发酵培养基的组成具体为:20g/L葡萄糖,17.1g/LNa2HPO4·12H2O,3g/L KH2PO4,0.5g/L NaCl,添加1mM MgSO4,0.1mM CaCl2,10mg/mL维生素B1。
9.权利要求1~8任一所述方法在食品、药品制备或动物饲料领域的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述药品制备是将生产得到的GABA用于制备可舒肝解虑、宁心安神、降血压或降低血糖的药物。
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