[发明专利]一种Aβ42

权利要求书

1.一种Aβ₄₂聚集诱导发光融合体，其特征在于，所述Aβ₄₂聚集诱导发光融合体具体为EPB-Aβ₄₂4F，是将Aβ₄₂氨基酸序列中第4位的苯丙氨酸替换为对叠氮基苯丙氨酸pAZF，获得Aβ₄₂4F突变体蛋白，再将AIE分子EPB与突变体蛋白Aβ₄₂4F进行生物正交点击化学反应，获得EPB-Aβ₄₂4F；

所述Aβ₄₂氨基酸序列如序列表SEQ ID No.1所示；

所述EPB的化学式为：C₃₈H₄₄N₂O₂Br₂。

2.权利要求1所述Aβ₄₂聚集诱导发光融合体的构建方法，其特征在于，具体如下：

(1)利用固相化学合成方法，将pAZF替换Aβ₄₂中4位的苯丙氨酸，获得Aβ₄₂4F突变体蛋白；

(2)利用铜催化叠氮端炔环加成反应将EPB与突变体蛋白Aβ₄₂4F进行生物正交点击化学反应，获得EPB-Aβ₄₂4F。

3.如权利要求2所述的Aβ₄₂聚集诱导发光融合体的构建方法，其特征在于，采用铜催化叠氮端炔环加成反应将EPB与Aβ₄₂4F进行生物正交点击化学反应的方法如下：1mL反应体系，反应条件及所用试剂添加量如下：

之后用PBS补足1mL；4℃反应8h，反应完成后，利用透析袋或者脱盐柱对反应体系进行脱盐。

4.权利要求1所述Aβ₄₂聚集诱导发光融合体在筛选Aβ₄₂聚集抑制剂中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，筛选Aβ₄₂聚集抑制剂的方法如下：在EPB-Aβ₄₂4F溶液中加入潜在抑制剂，激发波长350nm，发射波长380nm-600nm范围内检测荧光强度，若荧光强度弱于不存在潜在抑制剂的EPB-Aβ₄₂4F体系，则判断所述潜在抑制剂为Aβ₄₂聚集抑制剂。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，在EPB-Aβ₄₂4F浓度为20μM，激发波长350nm，发射波长480nm条件下检测。