[发明专利]一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法

说明书

一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法。其基础培养基包括组分：葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、无水乙酸钠、磷酸氢二钾、柠檬酸二铵、硫酸镁、硫酸锰、牛肉膏、吐温80。其冻干菌粉保护剂包括组分：蔗糖、乳糖、海藻糖和磷酸氢二钾。植物乳杆菌冻干菌粉中活菌数可以达到4.08×10⁸CFU/mL以上。该制备工艺条件可以极大程度的保证细菌的存活率，在应用微生物领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法。该制备工艺条件能够极大程度的保证细菌的数量以及存活率，因此在应用微生物领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

背景技术

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳杆菌科(Lactobacillaceae)乳杆菌属(Lactobacillus)中的一种，常存在于发酵的蔬菜和果汁中。植物乳杆菌作为人体胃肠道的益生菌群，具有维持肠道内菌群平衡、提高机体免疫力和促进营养物质吸收等多种功能。

植物乳杆菌在食品工业中应用十分广泛。由于对食盐、亚硝酸盐具有良好的耐受性，对蛋白质、脂肪无明显直接的分解作用等特点，在发酵肉制品中应用很多。同时，也广泛用于发酵植物性食品，此外利用植物乳杆菌还可以生产共轭亚油酸。

类似此类益生菌一般情况下使用的是益生菌制剂，所以益生菌制剂的制备均以获得理想的直投式乳酸菌发酵剂为目标。但是益生菌制剂的功效取决于许多因素，其中最重要的特征是益生菌在储存过程中的存活和生产过程中的快速生长，这意味着这些细菌在加工和随后储存过程中的存活率是最重要的。长期保存细菌最常用和成功的方法是冷冻干燥。在冻干的过程中，冰晶的形成、膜损伤造成膜内溶质渗出而导致的高渗透压、水分的流失、大分子物质的变性都会对细胞存活率造成影响。在之前的研究中发现通过添加保护剂可以增强冷冻干燥和储存期间益生菌的稳定性，提高细菌存活率。但是具体如何去配制保护剂以及用什么比例配制效果最佳尚不清楚。

为了菌粉制备工艺的探究，本实验首先对植物乳杆菌的离心收集工艺进行探究，并对冷冻干燥过程中常用的几种保护剂进行了单因素试验，之后在此基础上进行正交试验，最终确定适合植物乳杆菌C3的最佳冻干保护剂配方。该制备工艺条件能够在一定程度上保证细菌的数量以及存活率，在应用微生物领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌C3菌粉制备最佳工艺条件

本发明以一种分离自天然发酵乳的维持肠道内菌群平衡、提高机体免疫力和促进营养物质吸收等多种功能的植物乳杆菌，以MRS液体培养基活化培养。

本发明的实现方式为：菌种的活化及鉴定、植物乳杆菌的离心收集工艺探究、植物乳杆菌菌粉冻干参数的优化。而在参数优化方面分别进行冻干保护剂的单因素筛选、冻干保护剂配方的最佳配比确定、菌泥与保护剂溶液最适混合比例的确定，结果以植物乳杆菌菌粉贮藏期间存活率的变化为指标，最终获得植物乳杆菌C3菌粉制备最佳工艺条件。

本发明通过对特定中植物乳杆菌的菌粉制备工艺进行探究，最大限度的保证了益生菌在储存过程中的存活和生产过程中的快速生长，即做到了细菌在加工和随后储存过程中的高存活率。并且长期保存细菌最常用和成功的方法是冷冻干燥，但是在冻干的过程中，冰晶的形成等诸多因素都会对细胞存活率造成影响。该制备工艺也在此基础上探究，通过对冻干保护剂配方的配比进行多次试验，最终确定的保护剂配方比例很好的保证了在冻干之前以及冻干过程中的细菌存活率。并且由于保护剂比例的调整，使得菌粉在长期保存的过程中也能很好的保证存活率。

该制备工艺条件可以在一定程度上保证细菌的存活率，在应用微生物领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。

具体实施方式

下面以植物乳杆菌C3为实例对本发明进行进一步说明。