[发明专利]一种用于镇脑宁胶囊的一测多评检测方法

权利要求书

1.一种用于镇脑宁胶囊的一测多评检测方法，其特征在于包括以下步骤：

将镇脑宁胶囊制成测试液；

用高效液相色谱仪测定测试液中丹参酮Ⅱ_A含量；

使用相对校正因子计算样品中隐丹参酮和丹参酮Ι的含量；

其中，步骤2）的测定方法为：

用高效液相色谱仪分别测定待测样品溶液和对照品溶液中丹参酮Ⅱ_A的峰面积，使用外标一点法或工作曲线法计算丹参酮Ⅱ_A的含量；

仪器：高效液相色谱仪；

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：乙腈：0.02%磷酸溶液为61:39；

流速：0.8-1.1ml/min；

柱温：25-35℃；

进样量：1-25μl；

检测器波长：268-272nm。

2.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，

其中，步骤1）将镇脑宁胶囊制备成测试液的方法如下：取镇

脑宁胶囊20粒内容物，混匀，取1.5-3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30-60ml，称定重量；超声处理10-40分钟，功率250W，频率42kHz；放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，

其中，步骤1）将镇脑宁胶囊制备成测试液的方法如下：取镇脑宁胶囊20粒内容物，混匀，取2.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，功率250W，频率42kHz；放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中外标一点法使用浓度为20μg/ml的丹参酮Ⅱ_A作为对照品，工作曲线法采用浓度范围在9-230μg/ml的至少五个梯度的丹参酮Ⅱ_A作为对照品溶液。

5.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，

其中，步骤2）中色谱条件设定如下：

色谱柱：Cosmosil C18-MS-Ⅱ，规格5μm，4.6×250mm;

流动相：乙腈：0.02%磷酸溶液为61:39；

流速：0.8ml/min；

柱温：30℃；

进样量：5μl；

检测器波长：270nm。

6.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，

其中，步骤3）中使用相对保留时间和相对校正因子分别确定和计算样品中隐丹参酮和丹参酮Ι的峰位置和含量；

定性方式：丹参酮Ⅱ_A相对于隐丹参酮和丹参酮I的相对保留时间分别为0.50-0.60和0.55-0.66；待测分析物的保留时间计算公式为：

其中，t_Rx和t_Rs分别代表供试品中待测组分和和丹参酮Ⅱ_A的保留时间，R_x/s代表相对保留时间；

定量方式：丹参酮Ⅱ_A相对于隐丹参酮和丹参酮I的相对校正因子分别为1.10-1.20和1.18-1.38；待测分析物的浓度计算公式为：

其中，A_x和A_s分别代表供试品中待测组分和丹参酮Ⅱ_A的峰面积，C_x和C_s分别代表供试品中待测组分和丹参酮Ⅱ_A的浓度，f_x/s代表供试品中丹参酮Ⅱ_A对待测成分的校正因子。

7.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤 3）使用相对保留时间和相对校正因子分别确定和计算样品中隐丹参酮和丹参酮I的峰位置和含量；

所描述的相对保留时间和相对校正因子如下：

定性：以丹参酮Ⅱ_A为单个标的物，隐丹参酮和丹参酮I的相对

保留时间分别为：0.54和0.58；

定量：以丹参酮Ⅱ_A为单个标的物，隐丹参酮和丹参酮I的相对

校正因子分别为：1.14和1.30。