[发明专利]一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒，其特征在于，ORF25在杆状病毒表面的展示通过将ORF25的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现，重组杆状病毒为载体表达的ORF25融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:3。

2.如权利要求1所述的重组杆状病毒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、从感染CyHV-2的组织匀浆中提取总DNA作为模板，以SEQ ID NO:1和SEQID NO:2为引物，扩增ORF25的胞外区基因片段；

步骤2、将获得的PCR产物用BamHI和EcoRI双酶切，克隆到pQBD表达载体，获得重组质粒pQBD-ORF25；

步骤3、用pQBD-ORF25和线性化的AcMNPV bacmid qBac-III共转染Sf9昆虫细胞，转染后5天收集P0代重组病毒；继续扩增，获得高滴度重组病毒；

步骤4、将重组杆状病毒稀释至滴度为4×10 3TCID 50/mL，将2cm大小的异育银鲫放入其中浸浴2小时进行免疫。

3.权利要求1所述展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒在防控CyHV-2的感染疫苗制备过程中的应用。