[发明专利]长裂苦苣菜生物碱四级分离物及其分离方法和应用

说明书

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及长裂苦苣菜生物碱四级分离物及其分离方法和应用。本发明通过超声方法提取长裂苦苣菜提取其中的生物碱成分，并利用制备色谱分离得到具有抗氧化能力的四级分离物，对长裂苦苣菜中生物碱类化合物的开发利用具有重要的现实意义。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及长裂苦苣菜生物碱四级分离物及其分离方法和应用。

背景技术

长裂苦苣菜(Sonchus brachyotus DC.)系菊科苦苣菜属一年生草本植物，又名苦菜、苦曲菜、苦曲曲、苦苣菜、苣荬菜、苦荬菜等。长裂苦苣菜药用历史悠久，据我国最早的医学专著《神农本草经》和李时珍的《本草纲目》记载，其味苦性寒，有清热解毒，消肿排脓，凉血化瘀，清肺止咳，益肝利尿，消食和胃之功效，用以治疗急性痢疾、肠炎、痔疮肿痛等症。长裂苦苣菜中的化学成分有β-谷甾醇，木犀草素，芹菜素和槲皮素，还有一些挥发油成分，研究表明，长裂苦苣菜具有抗菌、将血压、降胆固醇、抗肿瘤、治疗肝炎和抗氧化等多方面作用。但迄今为止，长裂苦苣菜中有效的抗氧化活性成分尚不清楚。

发明内容

本发明的目的在于提供一种长裂苦苣菜生物碱四级分离物。

本发明的再一目的在于提供上述四级分离物的分离方法。

本发明的再一目的在于提供上述四级分离物的应用。

根据本发明具体实施方式的长裂苦苣菜生物碱四级分离物，其由包括以下步骤的方法制备得到：

(1)制备长裂苦苣菜提取物；

(2)将步骤(1)得到的长裂苦苣菜提取物配制成100mg/mL的供试液，采用制备色谱法进行分离，色谱条件如下：

采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速10mL/min，柱温27-33℃，波长为255-265nm，梯度洗脱程序为：

在0-5min的时间范围内，流动相A的体积由95％变为60％，流动相B的体积由5％变为40％；在5-15min的时间范围内，流动相A的体积由60％变为30％，流动相B的体积由40％变为70％；在15-30min的时间范围内，流动相A的体积由30％变为20％，流动相B的体积由70％变为80％；在30-35min的时间范围内，流动相A的体积保持为20％，流动相B的体积保持为80％；收集峰高范围在420-2000mAU的馏分，得到初级分离物；

(3)将步骤(2)得到的初级分离物浓缩、干燥后，配制成10mg/mL的供试液并采用制备色谱法分离，色谱条件如下：采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速10mL/min，柱温27-33℃，波长为255-265nm，梯度洗脱程序为：在0-5min的时间范围内，流动相A的体积由95％变为60％，流动相B的体积由5％变为40％；在5-15min的时间范围内，流动相A的体积由60％变为30％，流动相B的体积由40％变为70％；在15-30min的时间范围内，流动相A的体积由30％变为20％，流动相B的体积由70％变为80％；在30-35min的时间范围内，流动相A的体积保持为20％，流动相B的体积保持为80％；收集峰高范围在0.2-1.8AU的馏分，得到次级分离物；

(4)将步骤(3)得到的次级分离物浓缩、干燥后，配制成10mg/mL的供试液并采用制备色谱法分离，色谱条件如下：采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速1mL/min，柱温30℃，波长为260nm，梯度洗脱程序为：