[发明专利]一种B族链球菌快速血清学分型的检测试剂盒及其制备方法

说明书

一种B族链球菌快速血清学分型的检测试剂盒及其制备方法，涉及微生物检测。所述B族链球菌快速血清学分型的检测试剂盒设有盒体和设置于盒体内的检测试纸，所述检测试纸设有底衬、以及由左往右依次连接并设置在底衬上的样品垫、标记垫、包被膜和滤纸。制备：1)荧光颗粒预处理；2)活化荧光微球；3)结合B族链球菌抗体；4)标记垫制备；5)包被抗体制备；6)纸条组装。方便快捷：应用于检测样本时，只需加样后等待10～15min即获得检测结果，操作简单。可用于临床培养鉴定的B族链球菌纯菌菌落，增菌培养液和临床常规采样的分泌物标本的检测和分型。

技术领域

本发明涉及微生物检测，尤其是涉及一种B族链球菌快速血清学分型的检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

B族链球菌(group B streptococcal,GBS)又名无乳链球菌，是一种寄居于泌尿生殖道和下消化道的条件致病菌。有文献报道，孕妇感染GBS可能会引起早产、胎膜早破、羊膜腔感染、产褥感染等不良妊娠结局([1]Landwehr-Kenzel,S.and P.Henneke,Interactionof Streptococcus agalactiae and Cellular Innate Immunity in Colonization andDisease.Front Immunol,2014.5:p.519)；新生儿如发生GBS感染可引起新生儿肺炎、败血症、脑膜炎、中毒性休克，严重者可能会有死亡的危险([2]Nielsen,M.,N.Sheikh,E.Fitzgerald,et al.Screening for early-onset invasive group B Streptococcaldisease in neonates in an Irish hospital(2001-2014):a retrospectiveaudit.Infect Dis(Lond),2017.49(6):p.466-470)。根据荚膜多糖的特异性，目前已知可以检测到的B族链球菌有10种血清型(Ia、Ib、II-IX型)，不同血清型毒力情况不同，研究表明，GBS血清型与分子分型有一定的关系，不同分子型GBS对应毒力基因和耐药基因不同([3]苏锦珍、吴伟元.围生期孕产妇感染或定植的B族链球菌耐药情况、血清型、毒力基因及基因型分析[J].中华妇幼临床医学杂志，doi：10.3877/cma.j.issn.1673-5250.2016.05.017)，其中毒力最强的为III型，它可以导致严重感染，同时III型也是国内外临床感染的最常见血清型。

目前临床常用GBS检测方法主要有：微生物细菌培养检测方法、分子生物学检测方法、免疫学检测方法。传统血平板分离单个菌落进行细菌培养鉴定的方法操作比较复杂，人为干扰因素较多，阳性率低([4]时春艳，曲首辉，杨磊等，妊娠晚期孕妇B族链球菌带菌状况的检测及带菌对妊娠结局的影响[J].中华妇产科杂志，2010,45(1)12-16)；分子生物学检测方法中，常见应用PCR检测技术，该方法特异性强、灵敏度高，可批量操作，相对比常规微生物培养法，大大提高阳性检出率，可是PCR法对实验室要求高，需要专有的PCR实验室，特有的实验设备，无法获得GBS菌株和进行药敏试验等缺点([5]贾忠兰，卢新，许丽风.三种方法筛查孕妇B族链球菌的效果评价[J]标记免疫分析与临床，2017，24(3)：338-339)。免疫层析法相比较于前面两种方法，操作简单，出结果时间短，国内有采用胶体金免疫层析方法对GBS进行快速抗原检测，但是目前没有直接对其血清型进行检测的方法，而对于GBS的临床检测，能够快速鉴定其血清型，对于预防用药更有意义。因此，早期检测GBS感染并鉴定其血清型，可望有效降低孕妇不良妊娠的产生，并对预防孕妇围产期胎儿和新生儿的感染，降低新生儿死亡率有着重要意义。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的第一目的在于提供检测方便快捷、检测灵敏度高、特异性强、可重复性高和检测结果可靠，在B族链球菌体外诊断领域具有广阔应用前景的一种B族链球菌快速血清学分型的检测试剂盒及其制备方法。

本发明的第二目的在于提供一种B族链球菌快速血清学分型的检测方法。