[发明专利]基因甲基化检测的试剂、方法和试剂盒

权利要求书

1.一种基因甲基化检测的试剂，所述基因为septin9基因，其特征在于，所述试剂包括第一核酸分子和第二核酸分子，其中，所述第一核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述第二核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示；所述试剂还包括第三核酸分子和第四核酸分子，其中，所述第三核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述第四核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示；所述试剂还包括第五核酸分子，所述第五核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示。

2.根据权利要求1所述的基因甲基化检测的试剂，其特征在于，所述第三核酸分子的一端具有荧光报告基团，另一端具有荧光淬灭基团。

3.一种基因甲基化检测的方法，所述基因为septin9基因，所述方法是以非疾病的诊断为目的，其特征在于，其包括：将经亚硫酸盐处理后的核酸样本与权利要求1-2任一项所述的试剂混合，进行PCR反应。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第一核酸分子的浓度为：0.35-0.45mM/μl。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，第一核酸分子的浓度为：0.4mM/μl。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第二核酸分子的浓度为：0.35-0.45mM/μl。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，第二核酸分子的浓度为：0.4mM/μl。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第三核酸分子的浓度为：0.15-0.25mM/μl。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第三核酸分子的浓度为：0.2mM/μl。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第四核酸分子的浓度为：0.15-0.25mM/μl。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，第四核酸分子的浓度为：0.2mM/μl。

12.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，PCR反应的体系中，第五核酸分子的浓度为：0.6-1.0mM/μl。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，第五核酸分子的浓度为：0.8mM/μl。

14.一种基因甲基化检测的试剂盒，所述基因为septin9基因，其特征在于，其包括权利要求1-2任一项所述的基因甲基化检测的试剂。

15.根据权利要求14所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸保护剂；所述核酸保护剂含有：6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸、四氢呋喃糠醇、聚乙二醇二甲醚、肉桂醛、芸香苷、四氢嘧啶、二硫苏糖醇、咪唑烷基脲、BSA和甘油。

16.根据权利要求15所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸保护剂包括：质量百分比为1％-10％的6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸、质量百分比为60％-80％的四氢呋喃糠醇、体积百分比为1％-10％的聚乙二醇二甲醚、体积百分比为0.5％-5％的肉桂醛、0.05-0.1mg/ml芸香苷、质量百分比为0.1％-1.5％的四氢嘧啶、0.01mM-0.5mM二硫苏糖醇、质量百分比为0.1％～0.5％的咪唑烷基脲、体积百分比为5％-30％的BSA和体积百分比为5％-30％的甘油。