[发明专利]适配体功能材料及其制备方法和在OTA检测的应用在审
申请号: | 201910734071.7 | 申请日: | 2019-08-09 |
公开(公告)号: | CN110592092A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 吴凤琪;岳振峰;张毅;吴绍精 | 申请(专利权)人: | 深圳市检验检疫科学研究院;深圳海关食品检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36;G01N30/34;G01N30/72 |
代理公司: | 44414 深圳中一联合知识产权代理有限公司 | 代理人: | 方良 |
地址: | 518000 广东省深圳市福*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 功能材料 适配体 链霉亲和素包被 磁珠 检测技术领域 链霉亲和素 亲和性结合 特异性识别 霉菌毒素 吸附容量 吸附稳定 吸附作用 生物素 检测 制备 应用 | ||
1.一种适配体功能材料,其特征在于,所述适配体功能材料包括:
链霉亲和素包被的磁珠以及与所述链霉亲和素包被的磁珠相结合的5’-Biotin-A18-22-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’;其中,所述链霉亲和素与生物素Biotin亲和性结合,A18-22为18-22个A碱基。
2.如权利要求1所述的适配体功能材料,其特征在于,所述适配体功能材料为链霉亲和素包被的磁珠以及与所述链霉亲和素包被的磁珠相结合的5’-Biotin-A20-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’。
3.一种适配体功能材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
提供链霉亲和素包被的磁珠,将所述链霉亲和素包被的磁珠分散于缓冲液中,得到磁珠分散液;
将5’-Biotin-A18-22-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’加入到所述磁珠分散液中,进行孵育处理,得到适配体功能材料。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,将5’-Biotin-A18-22-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’加入到所述磁珠分散液中的步骤中,A18-22选为A20;和/或,
5’-Biotin-A18-22-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’的浓度为0.5μmol/L。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液,且所述缓冲液的pH=7.2;和/或,
所述缓冲液中Tris-HCl的浓度为20mmol/L。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述孵育处理的时间为3.5-4.5h。
7.一种权利要求1或2所述的适配体功能材料和/或权利要求3-6任一项所述的制备方法得到的适配体功能材料在OTA检测中的应用。
8.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述OTA检测包括如下步骤:
提供OTA样品溶液;
将所述适配体功能材料加入所述OTA样品溶液中混合,进行吸附处理;
将吸附处理后的适配体功能材料进行洗脱处理,经色谱分析,检测OTA含量。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述吸附处理的时间为1.5-2h;和/或,
所述吸附处理的温度为45-50℃;和/或,
所述吸附处理的体系中含有10mmol/L的Mg2+或5mmol/L的K+;和/或,
所述洗脱处理中所用的洗脱溶剂为乙腈水溶剂;和/或,
所述洗脱处理为超声洗脱处理。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述色谱分析为超高效液相色谱分析,且色谱分析条件包括:色谱柱为Shim-pack XR-ODS,流动相为乙腈-水(1:1,v/v,含1%甲酸),流速为0.4mL/min,进样量为5μL,柱温为35℃;和/或,
荧光检测的激发光波长333nm,发射光波长460nm。
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